犬2型腺病毒E3区表达载体的构建  

The construction of E3region expressing vector of CAV-2

作　　者：邱薇[1] 夏咸柱[2] 范泉水[1] 扈荣良[2] 王雷[2] 高玉伟[2] 张守峰[2] 孙阳[1] 尹惠琼[1] 

机构地区：[1]成都军区联勤部军事医学研究所,昆明650032 [2]解放军军需大学军事兽医研究所,长春130062

出　　处：《生物技术通讯》2003年第1期8-11,15,共5页Letters in Biotechnology

基　　金：全军"十五"医药卫生重点项目(01-Z-092);国家自然科学基金项目(30170704)

摘　　要：利用构建的犬2型腺病毒E3区缺失质粒pBE3L分别构建了含有和不含外源性启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因和狂犬病病毒糖蛋白(Rgp)基因的重组表达质粒pBE3LGFP、pBE3LCGFP、pBE3LRgp和pBE3LCRgp,并分别对DK细胞进行了转染实验,以检测其表达,结果显示,pBE3LCGFP质粒在转染DK细胞后,于36h即可观察到荧光,72～96h无明显差别,传3代后仍可见表达荧光的细胞,pBE3LCRgp质粒转染DK细胞后,于48～96h用间接免疫荧光染色可检测到糖蛋白的表达,而pBE3LGFP和pBE3Rgp质粒转染DK细胞后经检测均无表达,表明构建的E3区缺失性载体不能利用E3区自身的启动子进行目的基因的表达,但利用外源性启动子可使外源基因获得良好表达。Several expressing vectors with or without forei gn promoter were constructed on the basis of deleted E3region of CAV-2using the GFP gene and Rgp gene as the report genes.The vectors were transfected into th e DK cells to de-tect their expression.The results showed that the vectors wit h foreign promoter can express the report genes,while the vectors without fore ign promoter can not express the report genes.

关 键 词：犬2型腺病毒 E3区 表达载体 

分 类 号：S852.655[农业科学—基础兽医学] Q782[农业科学—兽医学]