改造的腺病毒5型E1A基因对TNF-α诱导的猪血管内皮细胞中NF-κB活性的抑制作用  

作　　者：马业伟[1] 周小山[1] 赵清正[1] 杨军[2] 高新[2] 李艳春[1] 刘玉英[1] 王争[1] 

机构地区：[1]中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所,北京100021 [2]军事医学科学院野战输血研究所,北京100850

出　　处：《科学通报》2003年第1期48-51,共4页Chinese Science Bulletin

基　　金：首都"二四八"重大创新工程资助项目

摘　　要：在延缓性免疫排斥反应(DXR)过程中, NF-κB发挥着关键作用. 如何恰到好处地抑制其活性是本领域研究的重要问题之一. 用改造的E1A基因(E1A)包括功能区(1 ~ 80氨基酸)和核定位区(139 ~ 243氨基酸), 删除其中可能对人体有害的CR2区, 将其克隆到真核表达载体pcDNA3中, 并转染猪血管内皮细胞(PAEC), 经G418筛选, 获得稳定表达细胞株. RT-PCR技术和细胞生长曲线分析, 证明E1AΔ基因能在PAEC中稳定表达, 且不影响细胞的正常生长, 并能抵抗肿瘤坏死因子-α (TNF-α)诱导的细胞凋亡. 报告基因分析表明, E1A(能抑制由TNF-α诱导的NF-κB活性, 其抑制率为53%, 对NF-κB信号转导途径下游的一个重要炎症基因--E-选择素基因的表达抑制率达63%. 综上, E1AΔ基因的这些功能基本符合异种器官移植中克服DXR的要求, 为利用E1AΔ基因克服DXR的可行性提供了实验依据.

关 键 词：器官移植 延缓性免疫排斥反应 猪血管内皮细胞 NF-кB 活性抑制 腺病毒 5型E1A基因 TNF-Α 

分 类 号：R392.1[医药卫生—免疫学]