水稻EPSP合酶第一内含子增强外源基因的表达  

作　　者：徐军望[1] 冯德江[1] 宋贵生[1] 魏晓丽[1] 陈蕾[1] 伍晓丽[1] 李旭刚[1] 朱祯[1] 

机构地区：[1]中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京100101

出　　处：《中国科学（C辑）》2003年第3期224-230,共7页Science in China(Series C)

基　　金：国家"八六三"高技术研究发展计划(批准号:2001AA21204;2001AA222251);国家自然科学重点基金(批准号:39989001);国家转基因植物研究与产业化专项基金(批准号:J99-A-020)

摘　　要：分离并克隆了水稻5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的第一内含子(EPI)。序列分析表明,EPI长704bp,GC含量为36.2％。为进一步研究EPI序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响,将EPI序列插入CaMV35S启动子和报导基因β-葡糖醛酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因(gus)之间。采用基因枪法转化烟草叶片,gus基因瞬时表达表明,EPI序列的存在可以使GUS的表达水平提高。利用农杆菌法转化烟草,获得了gus基因稳定表达的植株。GUS活性检测表明EPI内含子的存在可以显著提高GUS基因的表达(P<0.01)。Northern blot分析表明,在转录水平上gus基因在含EPI内含子的转基因植株中的表达高于不含EPIgus基因的表达,并且成熟的gus mRNA中EPI被正确剪取掉了,表明是一种非转译的内含子。GUS定量检测表明,EPI存在可以使GUS的平均表达水平提高3倍,最高单株可提高6倍。

关 键 词：水稻 EPSP合酶 5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因 第一内含子 基因表达 转基因植物 

分 类 号：S511.03[农业科学—作物学]