培养9天的组织工程化真皮低温保存的研究  

CRYOPRESERVATION OF TISSUE ENGINEERED HUMAN DERMAL REPLACEMENT CULTURED FOR 9 DAYS

作　　者：王欣[1] 华泽钊[1] 杨光辉[2] 崔磊[2] 刘伟[2] 曹谊林[2] 程启康[1] 

机构地区：[1]上海理工大学低温生物医学与技术研究所,上海200093 [2]上海市组织工程研究与开发中心,上海200235

出　　处：《低温工程》2003年第1期17-22,共6页Cryogenics

基　　金：国家自然科学基金重点项目 (5 9836 2 4 0 );上海市重大科技攻关项目 (0 0DJ14 0 0 1 6 )的资助

摘　　要：组织工程化真皮的低温保存是皮肤组织工程的重要组成部分 ,对皮肤组织库的建立有重要意义。以培养一定时间的组织工程化真皮为试材 ,以四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率 ,辅以光学显微镜和扫描电镜观察分析 ,试验研究了低温保护剂预处理方式、降温程序及降温速率等条件对组织工程化真皮低温保存效果的影响。实验表明 :将组织工程化真皮置于 2 1mol/L的DMSO溶液中 ,在 4°C下处理 1 5min ,再只将组织工程化真皮转入低温保存袋中 ,迅速热封口 ,以 1°C/min速率降温且无恒温处理可获得较高的细胞存活率 ( 72 8%～ 78% ) 。Cryopreservation of tissue engineered human dermal replacement plays an important role in skin tissue engineering and skin banking.With the inspection of microscope and electronic scanning microscope and viability evaluation by the tetrazolium salt,MTT(3 [4,5 Dimethylthiazol 2 yl] 2,5 diphenyltetrazolium bromide),the effects of cryoprotectant pretreatment pattern,the cooling rate and the cooling procedure on the dermal replacement were investigated.The results indicate that after the immersion of the dermal replacement in Me(2)SO solution(2 1M)for 15min under 4 °C,transfering it into a cryopreservation bag,sealing off the bag immediately,cooling at 1 °C/min to -60 °C and then plunging it into liquid nitrogen can get a higher viability(72 8%～78%)and meet the clinical needs.

关 键 词：组织工程化真皮 低温保存 皮肤组织工程 四唑盐比色法 细胞存活率 

分 类 号：R318.08[医药卫生—生物医学工程]