人转化生长因子TGF-β_3基因合成及其在大肠杆菌中的表达  

Expression of Human Transforming Growth Factor β_3 in E.coli BL21

作　　者：黄亚东[1] 苏志坚[1] 郑青[2] 赵文[1] 许华[2] 吴晓萍[2] 胡晓辉[1] 李校堃[1] 刘丙萍[3] 

机构地区：[1]暨南大学医药生物技术研究开发中心 [2]暨南大学药学院,广州510632 [3]山东曲阜师范大学,曲阜273165

出　　处：《中国药科大学学报》2003年第3期264-267,共4页Journal of China Pharmaceutical University

基　　金：国家"973"基金资助项目 (编号G19990 5 42 0 4) ;广州市科技攻关项目 (编号 2 0 0 2E3 E4111)~~

摘　　要：目的 :构建能高效表达人转化生长因子 β3 (TGF β3 )的基因工程菌。方法 :用PCR方法扩增人转化生长因子 β3 的cDNA ,将该cDNA片段插入表达载体pET3c的表达框架中 ,构建了表达菌株BL2 1/pET TGF β3 。IPTG诱导表达。通过阳离子交换、变性分子筛层析纯化重组蛋白。用Western blot杂交检测重组蛋白的免疫原性。结果 :所构建的表达菌株 ,其TGF β3 的表达量占菌体总蛋白 2 5 %以上。经纯化获得了银染一条带的重组蛋白。免疫学检测表明重组蛋白具有较强的抗原特异性。结论 :人转化生长因子 β3 在大肠杆菌中实现了高效表达 ,获得了具有免疫原性的重组TGF β3 。AIM:High-level expression system of human Transforming Growth Factor β 3 was constructed. METHOD:TGF-β 3 cDNA produced by PCR was cloned into the expression vector pET3c. The expression was induced by IPTG. The expressed TGF-β 3 was purified by ionic exchange and molecular sieve chromatography from the inclusion body of bacteria lysate. RESULT:The expression level of the recombinant TGF-β 3 in E. coli BL21 was about 25%. The purified TGF-β 3 has strong antigen specificity. CONCLUSION:Recombinant TGF-β 3 was produced with high yield in E.coli BL21.

关 键 词：人转化生长因子β3 克隆 表达 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]