检测细胞色素P-450基因族中CYP1A1基因表达的一个简捷方法(英文)  

A Simple Method for Detection of the Expression of CYP1A1 Gene

作　　者：周仁清[1] 沈英娃 周樱桥[3] 白雪峰[4] 阿尔夫瑞德.豪葛 

机构地区：[1]辽宁大学 生命科学系,辽宁沈阳110036 [2]国家环境保护化学品登记中心,北京100012 [3]中国科学院 沈阳生态研究所,辽宁沈阳110015 [4]辽宁大学生命科学系,辽宁沈阳110036 [5]密执安州立大学 微生物系,美国东兰辛48824

出　　处：《辽宁大学学报（自然科学版）》2003年第3期264-269,共6页Journal of Liaoning University：Natural Sciences Edition

摘　　要：NMR1系雄性小鼠被用来研究肺微粒体细胞色素P450家族中一个同功基因CYP1A1在香烟烟雾的诱导下表达.双轮回‘聚合酶链式反应’(PCR)和‘反向转录酶-聚合酶链式反应’(RT-PCR)被用来检测基因CYP1A1的转录水平.代表CYP1A1蛋白活性的7-乙氧基试卤灵-0-去乙基酶(EROD)的活性被用来检测基因CYP1A1的表达.双轮回‘聚合酶链式反应’(PCR)和‘反向转录酶-聚合酶链式反应’(RT-PCR)被用来检测基因CYP1A1的转录水平.测试结果表明在吸入香烟烟雾的情况下,小鼠肺微粒体EROD的活性和基因CYP1A1的转录水平是同步增加的.这个结果不同于以前在同样实验条件的一个自相矛盾的结果,即在CYP1A1蛋白增加时,基因CYP1A1的转录水平却是下降或不变.这说明本文所使用的方法可能要优于以前的实验方法.Pulmonary microsomes of male NMR1 mice were used to study the inductive effect of cigarette smoke on cytochrome P450 isoform CYP1A1 gene expression. The CYP1A1 protein activity was evaluated by the catalytic activity of 7 - ethoxyresorufin 0 - deethylase ( EROD). A double - round reverse transcriptase - coupled polymerase chain reaction ( RT - PCR) was applied to detect the CYP1A1 transcript. The results showed that the pulmonary mi-crosomal EROD activity was elevated and the corresponding CYP1A1 transcript increased at the same time in the mice exposed to cigarette smoke. These results are different from previous data that the pulmonary CYP1A1 mRNA was decreased or not detected while the CYP1A1 protein level was increased in male NMRI mice exposed to cigarette smoke.

关 键 词：细胞色素 P-450基因 CYP1A1基因 基因表达 反向转录酶-聚合酶链式反应 基因转录 香烟 肺 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]