对生蒴蛤谷胱甘肽转移酶的光谱研究  

Spectroscopic Characterization of Glutathione S-Transferase of Asaphis dichotoma

作　　者：杨海灵[1] 高波[2] 曾庆银[2] 付学奇[2] 聂力嘉[1] 朱圣庚[1] 周先碗[1] 

机构地区：[1]北京大学生命科学学院,北京100871 [2]吉林大学生命科学学院,长春130023

出　　处：《高等学校化学学报》2003年第8期1472-1476,共5页Chemical Journal of Chinese Universities

基　　金：国家海洋"八六三"计划 (批准号 :819-0 4-0 2 )资助

摘　　要：为深入了解海洋软体生物谷胱甘肽转移酶 (GSTs)的性质和特点 ,以对生蒴蛤肝肠为材料 ,经 GSH亲和层析与反向 HPLC分离得到纯化蛋白 (ad GST) ,经 SDS-PAGE、凝胶过滤与飞行时间质谱分析确定该酶为双亚基组成 ,全酶分子量 5 0 0 0 0 ,亚基为 2 5 0 0 0 .紫外光谱分析表明 ,该酶在 2 80 nm有最大吸收峰 ;荧光光谱分析表明 ,该酶的最大激发波长为 2 80 nm,在 35 0 nm有最大发射峰 ;用圆二色谱与傅里叶变换红外光谱对该酶进行二级结构测定 ,结果表明 ,该酶含有约 35 %左右的α-螺旋 ,30 %左右的β-折叠 ,表明该酶属于典型的球状蛋白 .A novel isoenzyme of glutathione S-transferase(adGST) was purified from the liver intestine of the seashell(Asaphis dichotoma) by GST-Sepharose 4B affinity chromatography and reverse HPLC. The enzyme was composed of two subunits with a molecular weight of 23 000 for each determined by SDS-PAGE, MALDITOF-MS and gel filtration. The characteristic peak of ultraviolet absorbance spectra of the adGST was at 280 nm, and that of fluorescence excitation spectrum was at 280 nm and that of the fluorescence emission spectrum was at 350 nm. The CD spectra and FTIR spectroscopy show that the adGST has a total secondary structure content of about 35% α-helix and 30% sheets. The adGST was a kind of global protein.

关 键 词：生蒴蛤 肝肠 圆二色谱 谷胱甘肽转移酶 光谱研究 傅里叶变换红外光谱 二级结构 

分 类 号：Q555[生物学—生物化学] O657.3[理学—分析化学]