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作 者:陈冬梅[1] 于敏[1] 李小卫[1] 高敏[1] 慕邵峰[1] 汪海[1]
机构地区:[1]军事医学科学院毒物药物研究所,北京100850
出 处:《中国临床药理学与治疗学》2003年第6期608-612,共5页Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics
基 金:国家重点基础研究发展规划项目 (№G19980 5 112 ) ;北京赛德维康医药研究院新药研究基金项目 (№ 19990 0 1)
摘 要:目的 :研究激活血管内皮细胞乙酰胆碱作用靶标 (ETA)对不同类型血管内皮细胞 [Ca2 + ]i 水平的影响 ;以 [Ca2 + ]i 水平作为鉴定ETA功能的指标之一 ,观察其在传代过程中的改变 ,为研究ETA的分子结构及其信号转导途径提供实验依据。方法 :采用激光共聚焦技术 ,以荧光指示剂Fluo 3为探针 ,观察乙酰胆碱 (ACh)和氨甲酰胆碱 (carbachol ,Car)对内皮细胞 [Ca2 + ]i 水平的影响。结果 :ACh和Car在10 -5~ 10 -2 mol·L-1可使 3~ 10代牛主动脉内皮细胞标本的 [Ca2 + ]i 水平显著升高 ,ACh在 10 -8~10 -2 mol·L-1可使 8代人冠脉内皮细胞标本的[Ca2 + ]i 水平显著升高。结论 :内皮细胞在 10代培养过程中外源性激动剂ACh和Car均可诱导胞内[Ca2 + ]i 水平升高 ,ETA的功能与 [Ca2 + ]i 水平升高有关。AIM: To examine intracellular calcium levels in bovine aorti c endothelial cells (BAEC) and human coronary aortic endothelial cells (HCAEC) by activating the endothelial target for acetylcholine (ETA). METHODS: As fluorescence probe, Fluo-3 was used in assaying [Ca 2+ ] i in end o thelial cells by cofocus. Nonselective agonists of cholinery receptors acetylcho line and carbachol were tested. RESULTS: Acetylcholine and carba chol can elicit the [Ca 2+ ] i elevation between the 3rd to 10th passage of BAEC or 8th passage of HCAEC at the concentration between 10 -5 and 10 -2 mol·L -1 ? CONCLUSION: ETA can be activated by acet ylcholine and carbachol and mediated the rise of intracellular Ca 2+ in BAE C and HCAEC until the 10th passage. This characteristic of ETA is not lost in cu ltured passages.
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