DMSO浓度及降温速率对组织工程化真皮超低温保存效果的影响  

THE EFFECTS OF DMSO CONCENTRATION AND COOLING RATE ON THE CRYOPRESERVED TISSUE ENGINEERED HUMAN DERMAL REPLACEMENT

作　　者：王欣[1] 华泽钊[1] 杨光辉[2] 崔磊[2] 刘伟[2] 曹谊林[2] 程启康[1] 

机构地区：[1]上海理工大学低温生物医学与技术研究所,上海200093 [2]上海市组织工程研究与开发中心,上海200235

出　　处：《细胞生物学杂志》2003年第5期309-312,T001,共5页Chinese Journal of Cell Biology

基　　金：国家自然科学基金重点项目(59836240);973项目(G1999054309;863项目(2002AA205041);上海市重大科技攻关项目(00DJ14001-6);上海市教委重点学科建设项目

摘　　要：组织工程化真皮的超低温保存技术是皮肤组织工程的重要组成部分,对皮肤组织库的建立有重要意义。低温保存与低温保护剂的种类、浓度、降温复温程序及低温保护剂的添加与去除方式有着密切的关系。实验目的:研究DMSO浓度及降温速率对组织工程化真皮超低温保存效果的影响。实验方法:以培养一定时间的组织工程化真皮为试材,以不同浓度的DMSO溶液为低温保护液,以不同的降温速率降温保存,以四唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,辅以光学显微镜和扫描电镜观察分析。实验表明:降温速率为1℃/min,DMSO浓度为1.4mol/L时可获得在实验范围内较高的细胞存活率,为75％,超低温保存后的扫描电镜照片表明其细胞形态最为接近新鲜状态,细胞与支架材料的黏附也很紧密,这与细胞存活率的研究结果有很好的相关性。Cryopreservation of tissue engineered human dermal replacement plays an important role in skin tissue engineering and skin banking. For a variety of cells, optimal cell recovery depends on the type of cryoprotectant, the concentration and exposure time to cryoprotectant, freezing and warming protocols, and even the adding and removing procedures of cryoprotectant solutions. With the inspection of microscope and electronic scanning microscope and viability evaluation by the tetrazolium salt, MTT(3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide), this study investigates the effects of cryoprotectant concentration and the cooling rate on the dermal replacement. The results indicate that a combination of 1℃/min and 1. 4mol/L DMSO can get a higher viability(75 %). And the micrograph confirmed this result.

关 键 词：组织工程 真皮 超低温保存 降温速率 DMSO浓度 

分 类 号：R644[医药卫生—外科学]