单纯疱疹病毒药物敏感性测定及耐药病毒株的建立  

Method for measuring antiviral susceptibility of herpes simplex virus and establishment of resistant strain

作　　者：胡楠[1] 管怀进[1] 杨玲[1] 

机构地区：[1]南通医学院附属医院眼科,南通226001

出　　处：《南通医学院学报》2004年第1期15-16,18,共3页ACTA Academiae Medicinae Nantong

摘　　要：目的 :探讨病毒药物敏感性的检测方法并建立体外耐药病毒株 ,为研究病毒耐药性及其治疗方法创造条件。方法 :将 HSV- 接种于非洲绿猴肾细胞 (VERO cells)中 ,加入不同浓度的无环鸟苷 (ACV)和更昔洛韦(GCV) ,培养 72 h后固定、染色、清点空斑数并计算药物的半数有效剂量 (ED50 ) ,通过比较药物对野生敏感病毒和待测病毒的 ED50 来判断后者的药物敏感性。将 HSV- 在含 ACV环境中连续培养 10代 ,分别在第 3、5、7和 10代测定 ACV的 ED50 。结果 :ACV对野生 HSV- 的 ED50 为 14 2 .0× 10 - 9mol· L- 1 ,GCV对野生 HSV - 的 ED50 为2 94 .0× 10 - 9mol· L- 1 。 HSV - 在含 ACV的环境中连续培养 7代后即产生了耐药性 ,其 ED50 为野生株的 82倍 ,第10代的 ED50 为野生株的 170倍。结论 :空斑抑制法是检测病毒药物敏感性的有效方法 ,体外耐药病毒株的建立为病毒耐药性研究创造了条件。Objective:To investigate the method for measuring antiviral susceptibility and to establish an acyclovir-resistant herpes simplex virus.Methods:HSV-Ⅰ was inoculated on African green monkey kidney (VERO) cells,ACV and GCV was added to the medium in various concentrations. After 72 hours incubation, plaques were counted and the 50% effective dose (ED 50)was calculated. HSV-Ⅰwas incubated in the presence of ACV for 10 passages. The ED 50 of ACV was determined after the 3,5 7and 10 passage.Results:The ED 50 of ACV and GCV to wild HSV-Ⅰwas 142.0×10 -9 mol·L -1 and 294.0×10 -9mol·L -1. In the presence of ACV, emergence of drug resistance was observed after passage 7 with ED 50 82 times that of the wild strain. After the 10 th passage the ED 50 was 170 times that of the wild strain. Conclusions:Plaque reduction assay is an efficient method for determination of antiviral drug susceptibility of HSV and the establishment of ACV-resistant strain is essential for the study of resistance.

关 键 词：单纯疱疹病毒 耐药性 无环鸟苷 空斑抑制 疱疹性角膜炎 

分 类 号：R373.11[医药卫生—病原生物学]