乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建  

Construction of Recombinant Virus Strain TK^- /gG^- /NS1^+ Recombinized by Pseudorabies Virus Ea Mutant Strain TK^- /gG^- /LacZ^+ and NS1 Gene of Japanese Encephalitis Virus

作　　者：徐高原[1] 王祥[2] 陈焕春[1] 徐晓娟[1] 李自力[1] 何启盖[1] 吴斌[1] 

机构地区：[1]华中农业大学动物医学院病毒室,武汉430070 [2]湖北省公安厅刑侦总队,武汉430070

出　　处：《畜牧兽医学报》2004年第2期192-197,共6页ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA

基　　金：教育部重大项目(编号0113);湖北省重点科技攻关项目(2001AA201B02)。

摘　　要：设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK NS1。将pUSK NS1与伪狂犬病毒Ea株TK /gG /LacZ+突变株基因组共转染真核细胞IBRS 2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK /gG /NS1+。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。One pair of primers was designed to subclone NS1 from pTNS1 into general transfer vector pUSK.A co- transfection experiment was carried out with the purified pUSK- NS1 and the genome of TK^- /gG^- /LacZ^+ mutant of pseudorabies virus Ea strain in IBRS- 2.By plaque purifications and PCR detection,we acquired recombinant virus TK^- /gG^- /NS1^+.Western- blot and ELISA showed that NS1 protein could be expressed in PK- 15 cell infected with TK^- /gG^- /NS1^+.This recombinant virus strain can be used for the study of duel- valence vaccine of JEV and PRV.

关 键 词：乙型脑炎病毒 NS1基因重组 伪狂犬病毒 中间转移载体 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学]