人参植物高质量RNA的分离及其皂苷生物合成相关新基因GBR6的表达分析  

Isolation of High-quality RNA and Expression Analysis of GBR6 Gene Involved in Ginsenoside Biosynthesis from Panax ginseng Plant Tissues

作　　者：罗志勇[1] 刘水平[1] 陈湘晖[2] 文斌[1] 陆秋恒[3] 罗建清[3] 熊德慧[3] 胡维新[3] 

机构地区：[1]中南大学生物科学与技术学院 分子生物学研究所,中国湖南长沙410078 [2]中南大学湘雅医院,中国湖南长沙410078 [3]中南大学

出　　处：《生命科学研究》2004年第1期52-57,共6页Life Science Research

基　　金：国家自然科学基金(39800190);湖南省自然科学基金(02JJY2045);中南大学杰出青年科学基金(200002);湖南省高校青年骨干教师基金(2001湘教通204号)

摘　　要：为从富含多糖的人参植物组织中分离出高质量的RNA,使用改进的两种异硫氰酸胍法,可从人参植物根组织中提取到较高产量和质量的总RNA。每克新鲜组织的RNA产量在80～110μg之间;经琼脂糖凝胶电泳分析,可见到28S和18SrRNA两条完整、清晰的条带;紫外分光光度法测得的A_(260)/A_(280)比值位于1.8～2.0。而且,使用该改良法分离的RNA,可广泛用于检测基因表达的RT-PCR与Northern印迹杂交分析以及cDNA文库构建等植物分子生物学研究。To find a simple and efficient method for isolating total RNA from Panax ginseng plant tissues rich in polysaccharides, two modified acid guanidinium thiocynate extraction methods were tested with fresh Panax ginseng roots tissues. These techniques, compared to other methods. gave better RNA yield in the range of 80-110 μg per gram fresh weight of tissue and higher quality with A260/A 280 ratios in the range of 1. 8 and 2. 0 and distinct 28S and 18S rRNA bands. Further, the total RNA obtained from the roots of Panax ginseng were suitable for a subtractive cDNA library construction, RT-PCR and Northern blotting hybridization assays. .

关 键 词：RNA 分离 皂苷 生物合成 基因 GBR6 基因表达 异硫氰酸胍法 人参植物 

分 类 号：Q946.22[生物学—植物学] Q943.2