一种快速准确构建酵母单杂交系统报道子的方法  

An Effective Method for Construction Yeast One-Hybrid System Expression Vector

作　　者：高世庆[1] 陈明[1] 程宪国[2] 李连城[1] 马有志[1] 

机构地区：[1]中国农业科学院作物育种栽培研究所农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京100081 [2]中国农业科学院土壤肥料研究所,北京100081

出　　处：《生物技术通报》2004年第2期45-48,57,共5页Biotechnology Bulletin

基　　金：国家"8 63"项目 ( 2 0 0 2AA2 2 40 81);国家转基因专项 (JY0 3 -A -18-0 1)资助

摘　　要：酵母单杂交系统是根据DNA结合蛋白 (即转录因子 )与DNA顺式作用元件结合调控报道基因表达的原理来克隆编码目的转录因子的基因 ,其中构建带有不同DNA顺式作用元件的报道子是该系统的重要环节。目前 ,构建酵母单杂交系统报道子主要采用随机串联的方法 ,由于串联的顺式作用元件的个数和方向不能控制 ,所以筛选报道子费时费力。尝试采用同尾酶定向克隆的方法 ,将顺式作用元件按相同方向和所需的个数串联起来 ,减少了筛选报道子所需的时间和费用。Using yeast one-hybrid system, some genes encoding transcription factor were cloned by interaction between DNA binding protein (transcription factor ) and cis-acting element. In yeast one-hybrid system, the construction of expression vector was the most important. In recent years, random tandem ligation of cis-acting elements were used to construct expression vector .Because number and orientation of cis-acting elements ligated into expression vector could not be controlled, selection of expression vector was time-consuming and arduous. Directional ligation by definite compatible ends was used to construct expression vector containing same orientation and definite number tandem cis-acting element in this paper. This method was effective and low-cost .

关 键 词：酵母单杂交系统 DNA结合蛋白 转录因子 基因 克隆 报道子 DNA顺式作用元件 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]