iNOS红色荧光蛋白报告基因载体的构建及其在细胞中的表达  

Experimental Technique Construction of red fluorescent protein reporter gene vector of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and its expression in cells

作　　者：刘志锋[1] 阚文宏[1] 秦清和[1] 邓鹏[1] 王静珍[1] 姜勇[1] 

机构地区：[1]第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东广州510515

出　　处：《中国病理生理杂志》2003年第12期1709-1712,共4页Chinese Journal of Pathophysiology

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .30 0 30 0 6 0;No.39870 332 );国家杰出青年科学基金资助项目(No .3992 5 0 14 )

摘　　要：目的 :构建iNOS启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体 ,为研究细胞内iNOS的基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具。方法 :采用基因重组技术构建了含iNOS启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRed1- 1-iNOSp ;用脂质体瞬时转染NIH3T3细胞 ,观察iNOS启动子对脂多糖 (LPS)刺激的反应。结果 :酶切和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的 ;该表达载体在NIH3T3细胞静息状态下表达水平很低 ,经LPS刺激后 ,在荧光显微镜下可看到高亮度的红色荧光。结论 :所构建的iNOS启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体是正确的 ,对生理相关刺激有很好的反应 ,可有效地用于iNOS基因表达信号调控机制的研究。

关 键 词：一氧化氮合酶 红色荧光蛋白 基因 调节 基因 报告 

分 类 号：Q291[生物学—细胞生物学]