大肠杆菌内猪生长激素cDNA基因表达产物的免疫电镜观察  

THE lMMUNOELECTRONMICROSCOPY FOR LOCALIZATION OF PRODUCTS EXPRESSED FROM PORCINE GROWTH HORMONE cDNA IN ESCHERICHIA COLI

作　　者：张永清 林庆文[2] 贾锋[1] 齐顺章[1] 

机构地区：[1]北京农业大学动物生化教研室 [2]北京农业大学电镜室

出　　处：《华南农业大学学报》1992年第A01期14-14,共1页Journal of South China Agricultural University

摘　　要：本室构建的温度诱导高效表达猪生长激素(pGH)cDNA基因的工程;pPT15/N4830的表达效率为30％左右。相差显微镜下可见表达细菌内有包涵体(inclusion bodies, IBs)存在。高速离心(12000g,10min)pGH主要在沉淀内。由于细菌在某些条件下也能产生其他IB颗料,为了证实我们见到的IBs是由pGH的产生而形成的,以及pGH在大肠杆菌内的分布情况,我们用免疫胶体金技术对诱导后的大肠杆菌进行了观察。所用的一抗为本室制备的兔抗猪生长激素多克隆抗体(滴度为32000),使用时稀释100倍;所用的二抗是10nm金颗料标记的SPA(军事医学科学院陈德惠教授惠赠),使用时稀释20倍。其他操作按常规进行。结果表明:1.大肠杆菌内产生的pGH以IBs的形式存在,IBs的大小不一,平均每个细菌内有3～4个IBs。2.IBs以外没有观察到pGH的存在,这与破细胞离心后上清的免疫印渍(Western blotting)结果相吻合。3.与文献报道的免疫酶标技术相比,用免疫胶体金技术观察的结果更加清晰。方法简便,容易掌握。

关 键 词：大肠杆菌 猪 激素 电子显微镜 免冯 

分 类 号：S858.282.4[农业科学—临床兽医学]