Mac-1在细胞内走向的直视研究  

作　　者：严鸣[1] 毛积芳[2] 韦毅[3] 钟纪根[1] 杨生生[2] 徐仁宝[1] 

机构地区：[1]第二军医大学基础医学部病理生理学教研室,上海200433 [2]第二军医大学基础医学部生化与分子生物学教研室,上海200433 [3]复旦大学生命科学院,上海200433

出　　处：《中国科学（C辑）》2004年第3期263-270,共8页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号: 39730210和30000068)

摘　　要：分别构建荧光蛋白(FP,fluorescenceprotein)与Mac-1的两个亚基(CD11b,CD18)融合蛋白表达载体,并在鉴定pYFP-CD18和pCD11b-BFP共转染的CHO细胞(CHO-Mac-1-FP)表达的Mac-1-FP(Mac-1fusedwithfluorescenceprotein)具有与正常白细胞表达的野生型Mac-1基本一致的结构与功能的基础上,结合应用PE标记的CD11b单抗,通过激光共聚焦显微镜观测CD11b,CD18在PMA刺激和ICAM-1结合后于胞内的走向与归宿.结果显示:(ⅰ)在静态的细胞膜上看不到Mac-1,PMA活化后1h,胞膜上可见CD11b-PE和YFP-CD18群集,2h后内吞,内吞后YFP-CD18的荧光减弱,提示Mac-1有部分降解;24h后PMA再次活化,部分CD11b-PE与YFP-CD18可再次出现在膜上,说明Mac-1还可以被循环利用.(ⅱ)ICAM-1包被磁珠与Mac-1-FP-CHO细胞作用后,4h内粘附增加,同时伴有Mac-1-FP的群集,8h后粘附减少,同时伴有Mac-1-FP的荧光逐渐减弱,这一过程与PMA活化后Mac-1-FP的变化过程类似,提示ICAM-1作用后也可能出现内吞并降解.由以上结果可以得出结论,Mac-1活化后的走向是由胞浆内转位到质膜上,然后内吞,内吞后被降解或可被再利用,与此同时粘附活性亦发生相应的变化,提示受体介导性内吞是白细胞粘附活性降低的重要机制之一.

关 键 词：MAC-1 PMA ICAM-1 走向 细胞 白细胞 免疫反应 

分 类 号：Q25[生物学—细胞生物学]