国家自然科学基金(30471546)

作品数：11被引量：14H指数：3
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赖型钩端螺旋体LipL32-HlyX融合基因真核表达载体的构建及在COS7细胞中融合表达的研究
《生物医学工程学杂志》2009年第2期385-389,共5页黄毕 鲍朗 钟琪 张会东 张英 
国家自然科学基金资助项目(30471546);教育部博士点基金资助项目(20040610049)
从赖型钩端螺旋体017株全基因组中通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)分别扩增出脂蛋白32(LipL32)和溶血素-X(HlyX)基因,应用重叠延伸PCR技术(Gene splicing by overlap extension PCR,SOEPCR)获得LipL32-HlyX融合基因。...
关键词：钩端螺旋体 LipL32-HlyX融合基因 真核表达 
赖型钩端螺旋体溶血素HlyX基因的克隆、表达及其细胞毒效应被引量：2
《中国病理生理杂志》2008年第11期2200-2203,共4页黄毕 鲍朗 钟琪 商正玲 王中平 
国家自然科学基金资助项目(No.30471546);教育部博士点基金资助项目(No.20040610049)
目的:克隆、表达HlyX基因并研究其细胞毒性效应。方法:从赖型钩端螺旋体017株全基因组中用PCR方法扩增出目的基因,双酶切构建重组质粒,转化E.coliJM109,诱导表达HlyX;将表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,Western blottin...
关键词：钩端螺旋体属 溶血素类 细胞毒性 基因 HlyX 
赖型钩端螺旋体017株外膜蛋白LipL32基因重组质粒的构建及其细胞毒性的研究
《四川大学学报（医学版）》2008年第3期347-350,共4页黄毕 鲍朗 钟琪 商正玲 张会东 王中平 
国家自然科学基金(批准号30471546);教育部博士点基金(20040610049)资助
目的构建赖型钩端螺旋体(钩体)017株外膜蛋白LipL32基因的重组质粒,并研究其细胞毒性。方法从钩体017株全基因组中用PCR方法扩增出目的基因,双酶切构建重组质粒,转化大肠杆菌,诱导表达LipL32蛋白,将表达的目的蛋白免疫新西兰大白兔,制...
关键词：钩端螺旋体 外膜蛋白 LIPL32 表达 细胞毒性 
赖型钩端螺旋体外膜蛋白LipL32基因真核表达载体的构建及表达的初步研究
《细胞与分子免疫学杂志》2008年第2期109-112,共4页黄毕 鲍朗 钟琪 商正玲 张会东 张英 
国家自然科学基金资助项目(30471546);教育部博士点基金资助项目(20040610049)
目的:构建赖型钩端螺旋体外膜蛋白LipL32基因真核表达载体并在COS-7细胞中表达,为钩端螺旋体DNA疫苗的研究和开发奠定基础。方法:从赖型钩端螺旋体017株全基因组中PCR扩增出目的基因,双酶切构建重组质粒pcDNA3.1-LipL32。脂质体转染法...
关键词：钩端螺旋体 外膜蛋白LipL32 真核表达 
赖型钩端螺旋体溶血素基因HlyX的真核表达及基因免疫
《中华微生物学和免疫学杂志》2008年第2期134-138,共5页黄毕 鲍朗 钟琪 商正玲 张会东 张英 
国家自然科学基金（30471546）;教育部博士点基金（20040610049）
目的在哺乳动物细胞中表达含有赖型钩端螺旋体溶血素基因HlyX的重组质粒，并检测其作为DNA疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效果。方法以赖型钩端螺旋体全基因组为模板，PCR扩增出目的基因HlyX，以质粒pcDNA3．1为载体，双酶切构建重组质粒...
关键词：钩端螺旋体 溶血素基因HlyX 真核表达 基因免疫 
构建Loa22基因去信号肽片段原核重组表达载体被引量：3
《中国组织工程研究与临床康复》2007年第37期7358-7360,共3页朱海龙 鲍朗 张会东 
国家自然科学基金资助(30471546)~~
目的:构建赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22基因去信号肽片段的原核表达载体,并对其进行克隆表达。方法:实验于2004-12/2005-12在四川大学华西医学中心感染免疫研究室完成。以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板,PCR扩增Loa22基因去信号...
关键词：钩端螺旋体 OMPA 信号肽 原核表达 
钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达
《四川大学学报（自然科学版）》2007年第3期702-706,共5页刘鱼 鲍朗 商正玲 钟琪 
国家自然科学基金(30471546)
分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(+)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增...
关键词：钩端螺旋体 lag42基因 克隆 表达 
赖型钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL41基因真核表达质粒的构建及表达被引量：1
《中国病理生理杂志》2007年第2期336-339,共4页朱海龙 鲍朗 李学敏 张会东 
国家自然科学基金资助项目(No.30471546)
目的:构建赖型钩端螺旋体LipL41基因的真核重组表达质粒、并对其表达进行检测。方法:以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板PCR扩增目的基因,克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1上。测序分析后酶切,并连接至真核表达质粒pcDNA3上,构建真核重...
关键词：钩端螺旋体属 基因 LipL41 真核表达 
大肠杆菌-钩端螺旋体重组穿梭质粒pGKINVA的构建及重组钩体的筛选
《四川大学学报（医学版）》2007年第1期81-83,共3页朱庆平 鲍朗 张会东 赵明才 
国家自然科学基金(批准号30471546)资助
目的构建大肠杆菌-钩体穿梭质粒pGK INVA,并重组于钩体PatocⅠ株,为进一步确定钩体invA基因的功能奠定基础。方法将invA基因克隆于pGK b le24载体,PCR、限制性内切酶双酶切及测序鉴定重组穿梭质粒pGK INVA。质粒pGK INVA经电穿孔法转化...
关键词：invA基因 大肠杆菌-钩端螺旋体重组穿梭载体 钩端螺旋体 
赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22基因的克隆分析及蛋白表达被引量：6
《中国人兽共患病学报》2006年第4期294-297,共4页朱海龙 鲍朗 张会东 王晓樱 李岩 
国家自然科学基金资助项目(No.30471546)
目的分析赖型钩端螺旋体OmpA膜蛋白Loa22的结构特征,并对其进行克隆表达。方法分别以问号状赖型钩体017株、56601株及双曲状钩体PatocI株基因组为模板PCR扩增目的基因。构建Loa22基因与质粒pGEX-4T-1的重组原核表达质粒,克隆筛选并测序...
关键词：钩端螺旋体 OmpA基因 克隆 表达 
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