荧光定量RT-PCR检测方法

作品数:128被引量:574H指数:11
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相关机构:广西大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所华南农业大学广西动物疫病预防控制中心更多>>
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猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:5
《中国兽医科学》2022年第11期1367-1372,共6页万娟 梁海英 曾智勇 汤德元 王彬 张婧旭 柳佳佳 边孟婷 黄书 
贵州省科技支撑计划项目[黔科合支撑(2021)一般162项目]。
为建立一种快速、特异、灵敏检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的荧光定量RT-PCR方法,参比NCBI中登录的S基因高度保守核苷酸序列,设计1对针对PEDV S基因的特异性引物和探针,建立TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示,建立的方法与猪圆环病毒2...
关键词:猪流行性腹泻病毒 TAQMAN探针 荧光定量RT-PCR方法 
西藏环状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:2
《中国兽医科学》2020年第11期1360-1364,共5页李楠 何于雯 孟锦昕 王静林 
国家重点研发计划项目(2016YFD0500303);云南省科技厅重点基金项目(2019FA015);国家自然科学基金项目(31660714);云南省畜牧兽医科学院基础研究项目(2019RW006,2019RW007,2019RW009);云南省科技人才和平台计划项目(2018HB046)。
为了建立检测西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)的快速核酸检测方法,根据新分离的西藏环状病毒(DH13C120)Seg-10基因序列,设计了特异性引物及探针。通过优化反应条件,建立了检测西藏环状病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法,并对该方法的...
关键词:西藏环状病毒 荧光定量RT-PCR 检测方法 
猪塞尼卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:9
《中国兽医科学》2019年第3期274-279,共6页刘健新 查云峰 鲁荣 任旭皎 黎振标 李慧子 张彭涛 宁章勇 
广东省科技计划项目(2016A020210079)
本研究根据猪塞尼卡病毒(SVA)VP1基因保守序列设计引物,通过优化反应条件,建立了实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性的评价。结果显示,该检测方法特异性好,灵敏度达10 copies/uL,变异系数均小于2.0%,操作简单...
关键词:塞尼卡病毒 荧光定量RT-PCR 检测 
仔猪免疫PRRSV疫苗后病毒血症的荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:1
《中国兽医科学》2018年第12期1522-1528,共7页丁尊俄 周碧君 赵双成 欧伟业 秦文学 李如举 罗引幸 刘丽娟 张旭 文明 程振涛 王开功 
贵州省科学技术厅农业攻关项目[黔科合NY(2015)3009-1号];贵州省研究生工作站计划项目(GZZ2017002);贵州省动物疫病防控与兽医公共卫生保障科技创新人才团队项目[黔科合人才团队(2015)4016号]
为建立一种快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)疫苗免疫后在猪体内病毒血症持续时间的方法。根据GenBank中PRRSV基因序列,设计1对针对N基因扩增的特异性引物,经RT-PCR扩增后连接到pMD19-T载体上,构建含有N基因片段的重组质粒。采...
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 疫苗 N基因 荧光定量RT-PCR 病毒血症 
猪嵴病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立和应用被引量:7
《中国兽医科学》2018年第4期438-442,共5页谢荣辉 刘霞 赵灵燕 倪柏锋 柴娟 王雅婷 吴赟竑 徐辉 
浙江省公益技术研究项目(2016C32053);浙江省公益技术研究项目(2017C32016)
根据猪嵴病毒3D基因保守序列设计引物和TaqMan探计.通过优化反应体系.建立了猪嵴病毒荧光定量RT—PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性和重复性评价;同时以10倍梯度稀释的质粒标准品建立荧光定量RT—PCR的标准曲线,构建定量...
关键词:猪嵴病毒 荧光定量RT-PCR 检测 
猪环曲病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立和应用被引量:3
《中国兽医科学》2017年第12期1481-1485,共5页谢荣辉 刘霞 赵灵燕 黄靖 柴娟 吴赟竑 徐辉 
浙江省公益技术研究项目(2016C32053)
根据猪环曲病毒N基因保守序列设计特异性引物与TaqMan探针,建立猪环曲病毒荧光定量RT-PCR检测方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法能检测猪环曲病毒,而对猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、猪星状病毒、A群猪轮状...
关键词:猪环曲病毒 荧光定量RT-PCR TAQMAN 
猪非典型瘟病毒的基因组特征分析及荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:10
《中国兽医科学》2017年第11期1357-1362,共6页许古明 葛士坤 张凯照 刘健新 任旭皎 崔灝 罗畅 宁章勇 
最近的研究表明,猪非典型瘟病毒(APPV)在我国猪群流行,并造成了严重的危害。本研究应用RT-PCR方法对APPV GD3株进行了全基因组扩增、测序,并进行了全基因组及其部分编码基因的遗传演化分析;根据APPV基因组编码的结构蛋白E2的基因序列,...
关键词:猪非典型瘟病毒 序列分析 荧光定量RT-PCR 
犬冠状病毒SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:14
《中国兽医科学》2017年第10期1207-1213,共7页王静 梁琳 逄春华 罗亚坤 袁维峰 崔尚金 
国家重点研发计划项目(2016YFD0501003;2017YFD0500905);中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS-15);中国农业科学院基本科研业务费(2016ywf-yb-12)
参考GenBank上登录的犬冠状病毒(CCoV)S基因的保守序列设计并合成1对特异性引物,建立了一种快速、灵敏和特异的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法,用于CCoV的检测。特异性试验结果表明,该方法特异性强,与犬瘟热病毒、犬腺病毒2型、副流感...
关键词:犬冠状病毒 荧光定量RT-PCR S基因 
坦布苏病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量:9
《中国兽医科学》2015年第1期15-19,共5页王楠楠 刘芳 许漩 张世伟 聂睿 殷冬冬 刘光清 王桂军 
安徽省教育厅重点科研项目(KJ2012A124);安徽省年度重点科研项目(11070303024);农业部科研任务专项
为建立检测坦布苏病毒的SYBR GreenⅠ绝对荧光定量RT-PCR,针对坦布苏病毒E基因设计1对特异性引物,用PCR扩增E基因后将其连接到pMD19-T载体上构建重组质粒。重组质粒经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板绘制了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲...
关键词: 坦布苏病毒 SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR E基因 绝对定量 
非洲马瘟病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:8
《中国兽医科学》2013年第11期1167-1174,共8页赵文华 杨仕标 李富祥 
公益性行业(农业)科研专项(200903037);云南省应用基础研究项目(2009ZC182M)
为建立非洲马瘟病毒(AHSV)TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank及自己所测的AHSV 9个血清型VP7的ORF全长核苷酸序列,设计2套位于AHSV基因组S7片段的特异引物及相应TaqMan探针。经试验,结果证实2套引物探针可将9种血清型的AHSV...
关键词:非洲马瘟病毒 TAQMAN探针 实时荧光定量RT—PCR 
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