定向进化

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基于磷脂酶水解圈定向筛选高效聚对苯二甲酸乙二醇酯降解酶
《微生物学报》2024年第3期745-754,共10页徐翰 蔡忆梅 陈晓倩 黄青松 吴敬 陈晟 颜正飞 
国家重点研发计划(2019YFA0706900);国家自然科学基金(42307279)。
【目的】目前自然环境中聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethylene terephthalate,PET)废弃物的积累严重威胁生态健康,因此PET的降解问题已成为全球性的热点问题。生物酶法降解PET技术以其绿色环保而备受关注,但天然PET降解酶的催化活性普遍偏...
关键词：定向进化 PET降解 水解圈 热稳定性 分子改造 
高通量技术在萜类合成酶筛选中的应用
《微生物学报》2024年第2期408-431,共24页李贝 邓子新 徐敏 侯安伟 
国家自然科学基金(22107038);合成生物学海河实验室重大攻关类和颠覆性创新项目(22HHSWSS00001,22HHSWSS00007);天津市合成生物技术创新能力提升行动项目(TSBICIP-CXRC-065,TSBICIP-CXRC-076);江西省科学院项目(2018-XTPH1-02,2018-YYB-02)。
萜类化合物种类繁多,生物活性多样,在食品、药品与化妆品等行业中具有广泛的应用。萜类化合物多来源于植物,然而随着合成生物学的快速发展,相较于传统的天然植物提取与化学合成方法,利用工程微生物进行萜类化合物异源合成的方法显得更...
关键词：高通量筛选 萜类合成酶 定向进化 萜类化合物 
萜类合成酶定向进化的新思路被引量：2
《微生物学报》2019年第4期591-600,共10页胡智慧 翁彦如 谌柄旭 于爱群 肖冬光 
天津市教委科研计划项目(2017ZD03);天津市自然科学基金(17JCYBJC40800);天津科技大学"海河学者"培育计划引进人才基金;南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室开放课题;天津市高等学校创新团队培养计划资助(TD13-5013);天津市科学技术委员会创新平台项目(17PTGCCX00190)~~
萜类化合物是天然产物中种类最多且主要存在于植物和微生物体内的一类化合物。随着越来越多具有应用价值的萜类化合物被挖掘,其应用前景引起了人们的关注,但由于含量低、提取成本高等缺点,因此制约了萜类化合物的广泛应用。合成生物学...
关键词：萜类化合物 萜类合成酶 合成生物学 定向进化 
应用易错PCR技术提高环糊精葡萄糖基转移酶的可溶性表达被引量：2
《微生物学报》2016年第10期1551-1560,共10页郭永华 陈济琛 贾宪波 陈龙军 蔡海松 林新坚 
国家公益性农业科研专项(201303094-05);福建省自然科学基金项目(2014J01105);福建省属公益类科研院所基本科研专项(2014R1022-3);福建财政社会公益研究(2060302)~~
【目的】对嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1的环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)基因进行定向进化,筛选得到胞外酶活性和可溶性表达定量提高的突变酶。【方法】采用易错PCR技术向环糊精葡萄糖基转移酶基因中随机引入突变,建立酶基因突变文库,筛选获得...
关键词：嗜热环糊精葡萄糖基转移酶 可溶性表达 定向进化 易错PCR 
枯草芽孢杆菌β-糖苷酶的克隆表达、体外定向进化及结构模拟被引量：1
《微生物学报》2015年第10期1273-1283,共11页刘震 陈倩 陈荫楠 王祖鑫 朱秋享 石贤爱 
国家海洋公益性行业科研专项子课题(201205022-3);福建省科技重大专项(2013NZ0003)~~
【目的】从枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增出bgl C基因并在大肠杆菌中表达,分析表达产物的酶学性质并进行结构模拟,为进一步研究其生理功能及结构解析奠定基础。【方法】将bgl C基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,通...
关键词：异源表达 易错PCR 底物特异性 CD光谱 寡聚体 结构建模 
易错PCR法提高土芽孢杆菌ZH1羧酸酯酶的热稳定性被引量：3
《微生物学报》2015年第8期1060-1067,共8页刘韩 吴丽云 高贺 倪辉 蔡慧农 朱艳冰 
国家自然科学基金项目(31401632);集美大学科研创新团队基金项目(2010A006)~~
【目的】对土芽孢杆菌(Geobacillus sp.)ZH1的羧酸酯酶基因进行定向进化,筛选得到酶热稳定性提高的突变酶。【方法】利用易错PCR技术向羧酸酯酶基因中随机引入突变,建立酶基因突变文库,筛选获得热稳定性提高的突变体,并对突变酶进行诱...
关键词：定向进化 易错PCR 羧酸酯酶 热稳定性 
微生物脂肪酶资源挖掘及其催化性能改良策略被引量：3
《微生物学报》2008年第9期1276-1281,共6页阎金勇 闫云君 
国家“863计划”(2006AA020203);武汉市科技攻关重点资助项目(200720422138)~~
脂肪酶催化在食品、医药、化工、能源等领域发挥重要作用。开发新型微生物脂肪酶资源,对脂肪酶进行修饰改良,是脂肪酶催化领域的重要研发内容。极端微生物和不可培养微生物脂肪酶的发掘是获取新型工业催化剂的热点;体外定向进化、杂合...
关键词：脂肪酶 宏基因组 定向进化 生物印迹 
嗜热酯酶APE1547催化活性的定向进化研究被引量：3
《微生物学报》2006年第2期259-262,共4页王秋岩 杨广宇 刘艳莉 王艳平 冯雁 
国家"973项目"(2004CB719606)~~
对来源于嗜热古菌Aeropyrum pernix的酯酶(APE1547)催化活性进行定向进化研究。利用APE1547特殊的稳定性,建立了准确的高通量高温酯酶筛选方法。对第一代随机突变库筛选获得了催化活性较野生型提高1.5倍的突变体M010,序列分析表明其氨...
关键词：定向进化 嗜热酶 酯酶活力 解离常数 
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