绵羊肺炎

作品数:300被引量:625H指数:14
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绵羊肺炎支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量:3
《中国兽医科学》2018年第8期965-970,共6页韩瑞鑫 申捷 申之义 
国家科技支撑计划资助项目(2015BAI07B02-06)
本研究旨在建立一种灵敏性高、特异性强的检测绵羊肺炎支原体的TaqMan实时荧光定量PCR方法。根据GenBank上已发表的绵羊肺炎支原体HSP70基因序列设计引物和探针,构建标准阳性质粒,建立实时荧光定量PCR方法。试验结果显示,该方法标准曲...
关键词:绵羊肺炎支原体 HSP70基因 TaqMan实时荧光定量PCR 
绵羊肺炎支原体免疫组织化学及间接免疫荧光检测方法的建立被引量:8
《中国兽医科学》2017年第2期172-178,共7页张建华 黄海碧 王晓晖 白帆 史晓娜 高媛 王力强 侯丽娜 郝永清 
国家科技支撑计划项目(2012BAD13B00);内蒙古自治区科技计划项目(201502070)
以病理组织学观察为基础,建立检测绵羊肺炎支原体的间接免疫组织化学和间接免疫荧光方法,以绵羊肺炎支原体标准血清为一抗,分别以家兔抗山羊Ig G-HRP和家兔抗山羊Ig G-FITC为二抗,对绵羊肺炎支原体阳性肺组织切片及阴性对照组切片进行H...
关键词:绵羊肺炎支原体 免疫荧光 免疫组织化学 检测 
绵羊肺炎支原体p60蛋白N端与C端的表达及其免疫学特性研究被引量:5
《中国畜牧兽医》2017年第2期371-376,共6页麻昌姣 郑佳琪 黄海碧 王晓晖 白帆 郝永清 
内蒙古自治区科技计划"舍饲肉羊疫病动态防控关键技术研究"(201502070);国家科技支撑计划"重点牧区"生产生态生活"保障技术集成与示范"(2012BAD13B00)
为分析绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)膜表面脂蛋白p60的免疫学特性,本研究分别扩增p60蛋白N端与C端的基因,并通过重叠延伸PCR将C端基因序列中的TGA(1 459-1 461bp)定点突变为同义密码子TGG。将扩增的基因片段分别插入到p...
关键词:绵羊肺炎支原体 p60蛋白 表达 
绵羊肺炎支原体荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量:6
《中国兽医科学》2016年第10期1270-1276,共7页黄坚 尹正军 岳华 汤承 
"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD13B06)
为建立快速检测绵羊肺炎支原体的荧光定量PCR方法,根据EF-Tu基因序列设计合成引物,构建含有EF-Tu基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,检验该方法的特异性、敏感性和重复性,并用于临床样本的检测。结果显示,本研究建立的方法能特...
关键词:绵羊肺炎支原体 EF-Tu基因 荧光定量PCR 检测部位 临床应用 
绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种和精氨酸支原体多重PCR检测方法的建立及应用被引量:8
《中国兽医学报》2016年第7期1131-1134,共4页郑佳琪 黄海碧 王晓晖 刘文浩 麻昌姣 岳全占 郝永清 
国家科技支撑计划资助项目(2011BAD18B01);草原肉牛肉羊绿色养殖关键技术集成研究与产业化项目(2012BAD13B00);重点牧区"生产生态生活"保障技术集成与示范项目
根据GenBank登陆的绵羊肺炎支原体(MO)、丝状支原体山羊亚种(MmC)和精氨酸支原体(M.arg)的相关基因序列,分别设计了扩增MO hsp70基因、MmC hsp70基因和M.arg ADI基因片段的特异性引物,通过对反应条件和反应体系的优化,建立了MO、MmC和M....
关键词:绵羊肺炎支原体 丝状支原体山羊亚种 精氨酸支原体 多重PCR 
绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体双重PCR检测方法的建立及应用
《中国畜牧兽医》2015年第9期2240-2245,共6页郑佳琪 黄海碧 王晓晖 李真亚 邢蒙恩 郝永清 
国家科技支撑计划(2012BAD13B00)“重点牧区“生产生态生活”保障技术集成与示范”;国家科技支撑计划(2011BAD18B01)“草原肉牛肉羊绿色养殖关键技术集成研究与产业化”
为建立绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法,本试验分别设计了绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的特异性引物,优化反应条件后对其特异性和敏感性进行评价,并对40份鼻拭子进行了检测。结果显示,该方法能同时扩增出绵羊肺炎支原体...
关键词:绵羊肺炎支原体 精氨酸支原体 双重PCR 
绵羊气管上皮细胞的分离培养及绵羊肺炎支原体对其的吸附被引量:3
《中国兽医学报》2015年第8期1239-1243,共5页黄海碧 郑佳琪 王晓晖 陈德浩 张超 刘利 郝永清 
国家科技支撑计划资助项目(2011BAD18B01;2012BAD13B00)
为建立简便、高效、稳定的绵羊气管上皮细胞的体外培养及鉴定的方法,并在所培养的细胞上研究绵羊肺炎支原体侵染模型,本研究利用链蛋白酶冷消化法对绵羊气管上皮细胞进行体外分离,通过差速贴壁法纯化气管上皮细胞并进行传代后用液氮保存...
关键词:绵羊 气管上皮细胞 绵羊肺炎支原体 
绵羊肺炎支原体P71蛋白分段表达及其间接ELISA方法的建立被引量:9
《中国预防兽医学报》2015年第8期623-627,共5页黄海碧 郑佳琪 王仁超 王晓晖 陈德浩 王灵芮 郭逸贤 郝永清 
国家科技支撑计划(2011BAD18B01;2012BAD13B00)
为研究绵羊肺炎支原体(MO)P71蛋白免疫学相关功能及建立MO的快速检测方法,本研究采用PCR扩增MO P71基因片段,测序后利用生物学软件分析P71蛋白的抗原表位,选取抗原表位富集的3个基因片段P71-1(1 bp^516 bp)、P71-2(505 bp^1 338 bp)和P7...
关键词:绵羊肺炎支原体 黏附基因 表达 抗原性分析 ELISA 
绵羊肺炎支原体黏附因子的定点突变及原核表达被引量:1
《中国动物传染病学报》2014年第2期83-86,共4页程晨 黄海碧 王晓晖 王仁超 谢红霞 郝永清 
国家科技支撑计划(2011BAD18B01)
本研究采用点突变PCR方法成功克隆并表达了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoiae,M.O)内蒙古分离株(SZWQ株)的黏附因子基因(SZWQ-860)。表达产物经SDS-PAGE电泳检测,与预期目的蛋白的大小一致,将重组蛋白纯化后经Western blot检测,...
关键词:绵羊肺炎支原体 黏附因子 定点突变 重组蛋白 
4种佐剂对绵羊肺炎支原体的免疫辅佐效力研究被引量:5
《中国畜牧兽医》2013年第3期220-223,共4页费磊 岳华 汤承 
"十二五"国家科技支撑计划项目课题(2012BAD13B06)资助;四川省科技创新产业链示范工程项目-山羊现代产业链关键技术集成研究与产业化示范(2011NZ0003)
不同种类的佐剂对同种抗原的免疫辅佐效力不同。为筛选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)灭活疫苗的理想佐剂,本研究制备了4种不同佐剂的MO灭活疫苗,分别免疫成年家兔,用MO间接血凝试剂盒测定免疫后1~9周血清抗体效价。检...
关键词:绵羊肺炎支原体 灭活疫苗 免疫效力 佐剂 
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