羊肺炎

作品数:485被引量:813H指数:15
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绵羊肺炎支原体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量:1
《中国兽医科学》2024年第9期1202-1208,共7页王晓楠 张纹纹 陈思宇 单依依 陈益 李文良 程子龙 杨蕾蕾 王金泉 刘茂军 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800603);国家自然科学基金青年基金项目(32202809);江苏省农业科学院探索性颠覆性项目ZX(21)1218;江苏省第五期“333高层次人才培养工程”科研项目(BRA2019092)。
为建立绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)的抗原快速定量检测方法,本研究通过单克隆抗体筛选和条件优化,建立了一种检测MO抗原夹心ELISA检测方法,建立的ELISA方法的最优条件为:单克隆抗体1A11浓度为105μg/m L,37℃孵育1 h后...
关键词:绵羊肺炎支原体 夹心ELISA 建立 
绵羊肺炎支原体荚膜多糖的提取纯化及反应原性分析被引量:2
《中国兽医科学》2024年第1期41-47,共7页田彤彤 葛家振 李倩倩 高鹏程 吴晓妮 宋国栋 刘一健 郑福英 储岳峰 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800704,2022YFD1302101);甘肃省科技重大专项(22ZD6NA012);中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2021-LVRI)。
本研究旨在提取绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)GH3-3的荚膜多糖,并验证其反应原性。用无水乙醇沉淀得到粗荚膜多糖,再通过苯酚抽提、酶处理去除核酸和蛋白质,进而纯化得到荚膜多糖,利用免疫荧光试验证明该荚膜多糖的反应...
关键词:绵羊肺炎支原体 荚膜多糖 三螺旋结构 反应原性 
绵羊肺炎支原体特异性诊断靶标筛选及其间接ELISA方法的建立被引量:2
《中国兽医科学》2023年第4期439-447,共9页李倩倩 高鹏程 葛家振 吴晓妮 田彤彤 许健 郝华芳 郑福英 蔺国珍 储岳峰 
国家重点研发计划项目(2022YFD1800704);中央高校基本科研业务费专项资金项目(31920220137)。
本研究旨在筛选出绵羊肺炎支原体(Mo)特异性抗原靶标,并建立间接ELISA方法。利用Pulldown实验结合LC-MS技术分析,筛选Mo的抗原靶标并进行表达纯化,使用Western-blot试验分析纯化蛋白的反应原性;免疫小鼠,分析蛋白免疫原性、制备免疫血清...
关键词:绵羊肺炎支原体 Mo pdhD 免疫原性 间接ELISA 
山羊支原体山羊肺炎亚种可视化实时荧光LAMP检测方法的建立及应用被引量:3
《中国兽医科学》2022年第6期671-678,共8页宋相阳 颜新敏 付磊 陈胜利 郝华芳 高鹏程 刘永生 储岳峰 
甘肃省重点人才项目(2021RCXM047);甘肃省重点研发计划项目(18YF1NA130);中国农业科学院兰州兽医研究所“元亨人才”项目(农科兰兽2020-119)。
为建立快速简便、灵敏度高、特异性强的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)核酸快速检测方法,选择Mccp的92.1基因序列为靶序列,设计2条外引物、2条内引物和2条环引物,并向反应体系中添加可视化染料羟基溴酚蓝(HNB)或荧光染料(Eva green),分...
关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种 可视化环介导恒温扩增 实时荧光环介导恒温扩增 核酸检测 
基于绵羊肺炎支原体Enolase蛋白建立间接ELISA抗体检测方法被引量:4
《中国兽医科学》2021年第12期1490-1497,共8页张梦洁 王佳婧 何苗锋 刘润春 恽佳蕾 李文良 毛立 张纹纹 孙敏 程子龙 杨蕾蕾 储岳峰 赵茹茜 刘茂军 
国家重点研发计划项目(2018YFD0502000);国家自然科学基金项目(31802196);江苏省第五期“333高层次人才培养工程”科研项目(BRA2019092)。
旨在建立一种检测绵羊肺炎支原体(Mo)血清抗体的间接ELISA方法,笔者构建了Mo Enolase基因原核表达载体,诱导表达后,纯化的重组蛋白用Western-blot分析其反应原性。以重组蛋白为包被抗原,建立了Mo间接ELISA抗体检测方法。结果显示,重组...
关键词:绵羊肺炎支原体 Enolase蛋白 原核表达 间接ELISA 
山羊支原体山羊肺炎亚种黏附山羊气管上皮细胞间接免疫荧光检测方法的建立被引量:1
《中国兽医科学》2021年第9期1090-1096,共7页蔡亚婷 郝华芳 张晓亮 袁婷 陈胜利 颜新敏 马丽娜 储岳峰 孙延鸣 
国家重点研发计划项目(2017YFD0500905);甘肃省自然科学基金项目(20JR5RA583);中国农业科学院兰州兽医研究所“元亨人才”计划项目(农科兰兽2020-119)。
以山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)M1801株和山羊气管上皮细胞(GTC)为研究对象,通过优化Mccp接种滴度、孵育时间及一抗、二抗工作浓度,建立Mccp黏附宿主细胞的间接免疫荧光检测方法。确定Mccp的最适黏附滴度为1.5×10^(7)~7.0×10^(7)copi...
关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种 黏附 间接免疫荧光 山羊气管上皮细胞 
绵羊肺炎支原体鹦鹉热衣原体二联灭活疫苗的免疫效力研究被引量:2
《中国兽医科学》2021年第9期1155-1162,共8页张静 李敏 高强 杨茹 刘少蓉 张伟 段跃强 
呼和浩特市科技计划项目(2018-高-重-4)。
为了评价本项目组自制的绵羊肺炎支原体鹦鹉热衣原体二联灭活疫苗的免疫效力,取制备的绵羊肺炎支原体SH-01株及鹦鹉热衣原体重组MOMP蛋白抗原等体积混合后与ISA201佐剂乳化制成灭活疫苗(至少含SH-01株2×10^(8)CCU/m L;重组MOMP蛋白0.3 ...
关键词:绵羊肺炎支原体 鹦鹉热衣原体 二联灭活疫苗 免疫保护 
绵羊肺炎支原体特异性分子检测靶标的筛选与应用被引量:1
《中国兽医科学》2021年第7期848-856,共9页陈芙 储岳峰 刘保红 陈胜利 郝华芳 王鹏雁 颜新敏 
国家重点研发计划项目(2016YFD0500907);中国农业科学院兰州兽医研究所“元亨人才”计划项目(农科兰兽2020-119)。
本文旨在筛选出特异性的绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)分子检测靶标,利用全基因组BLASTn筛选出绵羊肺炎支原体特异性蛋白基因序列,再运用NCBI线上Primer BLAST程序,选择G/C含量较高的4个靶基因设计11对引物,通过引物筛选和...
关键词:绵羊肺炎支原体 分子诊断靶标 筛选 
山羊支原体山羊肺炎亚种特异性分子检测靶标的鉴定和应用被引量:2
《中国兽医科学》2020年第10期1257-1262,共6页吴娅琴 刘保红 袁婷 陈芙 蔡亚婷 郝华芳 陈胜利 马丽娜 刘永生 颜新敏 储岳峰 
国家重点研发计划项目子课题(2016YFD0500907、2017YFD0500905);家畜疫病病原生物学国家重点实验室重大成果培育项目(SKLVEB2016CGPY04);甘肃省重点研发计划项目(17YF1NA070,18YF1NA130)。
本文旨在筛选出新的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)特异性分子诊断靶标。首先通过全基因组本地BLASTp方法筛选得到Mccp理论上特异的蛋白基因序列,经BLASTn验证、优选特异性基因92.1作为候...
关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种 分子诊断靶标 引物 诊断 
山羊支原体山羊肺炎亚种M17基因的原核表达及细胞定位研究被引量:1
《中国兽医科学》2020年第8期1023-1028,共6页赵国强 郝华芳 陈胜利 颜新敏 马丽娜 邹璐 史耀旭 刘永生 曾巧英 储岳峰 
国家重点研发计划项目(2017YFD0500905,2016YFD0500907);甘肃省重点研发计划项目(18YF1NA130);家畜疫病病原生物学国家重点实验室重大成果培育项目(2016-7)。
为分析山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)氨基肽酶M17的特征及细胞定位。参照GenBank中Mccp M1601株的M17基因序列,优化密码子,合成原核表达载体pET30a-M17,将鉴定正确的表达载体转化大肠杆菌B...
关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种 M17基因 原核表达 代谢抑制 细胞定位 
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