易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖被引量：4
《生物工程学报》2019年第9期1787-1796,共10页潘梦妍 徐显皓 刘延峰 李江华 吕雪芹 堵国成 刘龙 
国家自然科学基金(Nos.31622001,21808084)资助~~
甲壳素酶具有广泛的工业应用前景,如可将虾壳、蟹壳和其他甲壳废物降解成以几丁寡糖为主的高附加值产品,但野生型甲壳素酶催化效率低,大大限制了几丁寡糖的生产。笔者在前期研究中表达了一个具有较高效催化效率的甲壳素酶Chisb,并对其...
关键词：甲壳素酶Chisb 几丁寡糖 催化效率 易错PCR 定向进化 
基于体外分子进化技术提高弯曲芽孢杆菌CCTCC 2015368 β-淀粉酶的热稳定性被引量：2
《生物工程学报》2018年第2期255-263,共9页陈磊 陈晟 吴敬 吴丹 
国家自然科学基金(No.31571776);国家杰出青年基金(No.31425020);江苏高校优秀科技创新团队项目;111计划(No.111-2-06);中央高校基本科研业务费专项资金(No.JUSRP51706A)资助~~
运用体外分子进化技术易错PCR方法,高通量筛选热稳定性提高的弯曲芽孢杆菌Bacillus flexus CCTCC2015368β-淀粉酶突变体。利用LB琼脂淀粉板显色、96-孔板DNS法测酶活和酶标仪检测等,最终筛选到了一株热稳定性显著提高的突变体D476N。...
关键词：分子进化 易错PCR Β-淀粉酶 热稳定性 
随机突变提高单胺氧化酶活性被引量：1
《生物工程学报》2014年第1期109-118,共10页陈雪君 马元慧 邵建华 赖敦岳 王志国 陈振明 
国家自然科学基金(No.31100584)资助~~
前期获得了一个对底物美西律具有一定活性的单胺氧化酶突变体A-1(F210V/L213C)。为进一步提高其酶活性,利用MegaWHOP PCR构建了库容约为104的随机突变库。筛选后获得了一个最优突变酶ep-1,比活力为A-1的189%。选择性测定结果表明,酶的...
关键词：单胺氧化酶 易错PCR 酶活力 分子动力学模拟 
易错PCR提高华根霉脂肪酶的热稳定性被引量：1
《生物工程学报》2013年第12期1753-1764,共12页王睿 喻晓蔚 徐岩 
国家高科技研究发展计划(973计划)(No.2011CB710800);国家高技术研究发展计划(863计划)(Nos.2012AA022207;2011AA02A209;2011AA02A210);中央高校基本科研业务费专项资金(No.JUSRP11014);国家自然科学基金(No.20802027)资助~~
为了提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的热稳定性,运用定向进化-易错PCR的方法,经两轮易错PCR引入突变,利用fast-blue RR顶层琼脂法对突变文库进行筛选,第一轮易错PCR后筛选到2株突变菌株,第二轮筛选到4株突变株。第...
关键词：定向进化 易错PCR 华根霉脂肪酶 热稳定性 毕赤酵母 
保守的第52位色氨酸突变引起的胰高血糖素样肽1受体N端片段活性丧失被引量：1
《生物工程学报》2013年第1期87-94,共8页高蔚丰 王娟 
宁夏高等学校科学研究项目(2010年度)资助~~
通过易错PCR方法建立了一个鼠肺不同长度的nGLP-1R(从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸)的噬菌体随机突变展示肽库,通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体N端片段(nGLP-1R)在缺失一段或两段基因后是否还具有结合Exendin-4的活...
关键词：胰高血糖素样肽1受体 EXENDIN-4 易错PCR 
定向进化提高嗜热拟青霉J18耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酸性条件下的催化能力被引量：10
《生物工程学报》2011年第12期1797-1804,共8页李一男 贾会勇 闫巧娟 江正强 杨绍青 
国家自然科学基金(No.31071508);新世纪优秀人才支持计划(No.NCET-08-0534)资助~~
应用定向进化技术提高了嗜热拟青霉Paecilomyces thermophila J18耐热β-1,3-1,4-葡聚糖酶(PtLic16A)在酸性条件下的催化能力。结合易错PCR和DNA改组的方法,构建了β-葡聚糖酶的突变体文库;利用刚果红染色法建立了阳性克隆的高通量筛选...
关键词：嗜热拟青霉 β-1 3.1 4.葡聚糖酶 易错PCR DNA改组 
基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化被引量：11
《生物工程学报》2011年第7期1100-1108,共9页张赛 邢克克 胡亚冬 谢春芳 刘大岭 姚冬生 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2007AA100605);广东省科技攻关计划(No.2009B020301001);暨南大学"211工程"经费资助~~
运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突...
关键词：黄曲霉毒素解毒酶 稳定性 定向进化 易错PCR 
通过体外分子进化技术提高淀粉液化芽胞杆菌BS5582 β-1,3-1,4-葡聚糖酶热稳定性被引量：5
《生物工程学报》2010年第9期1293-1301,共9页秦久福 高威威 李崎 李永仙 郑飞云 刘春风 顾国贤 
"十一五"国家科技支撑计划(Nos.2008BAI63B06;2007BAK36B01);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA);长江学者和创新团队发展计划项目(No.IRT0532)资助~~
应用基于易错PCR随机突变的体外分子进化技术,来提高淀粉液化芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶的热稳定性。利用建立的基于96微孔板高通量筛选模型,经过两轮定向进化与高通量筛选,共筛选得到3株热稳定性明显提高的突变体2-JF-01、2-JF-02和2...
关键词：Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 体外分子进化 易错PCR 热稳定性 
利用SPT3的定向进化提高工业酿酒酵母乙醇耐受性被引量：15
《生物工程学报》2010年第2期159-164,共6页赵心清 姜如娇 李宁 杨晴 白凤武 
国家自然科学基金项目(No.30500011);国家高科技研究发展计划(863计划)(No.2007AA10Z358)资助~~
利用对转录因子的定向进化可对多基因控制的性状进行有效的代谢工程改造。本研究对酿酒酵母负责胁迫相关基因转录的SAGA复合体成分SPT3编码基因进行易错PCR随机突变,并研究了SPT3的定向进化对酿酒酵母乙醇耐性的影响。将SPT3的易错PCR...
关键词：定向进化 乙醇耐性 SPT3 酿酒酵母 易错PCR 
定向进化-易错PCR方法提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的活力被引量：15
《生物工程学报》2009年第12期1892-1899,共8页王睿 喻晓蔚 沙冲 徐岩 
国家自然科学基金(No.20802027);国家高科技研究发展计划(863计划)(Nos.2009AA101500;2008AA10Z304;2007AA100401;2006AA020202);"十一五"国家科技支撑计划重大项目(No.2008BAI63B07);长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0532)资助~~
运用定向进化-易错PCR的方法,提高了华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的活力。经过两轮易错PCR和pNPP顶层琼脂法筛选,从第一轮和第二轮突变库中分别筛选获得最佳突变株1-11和2-28,脂肪酶酶活与野生菌株相比分别提高2倍和4...
关键词：定向进化 易错PCR 华根霉脂肪酶 脂肪酶活力 
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