吴东林

作品数：14被引量：25H指数：3
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发文主题：端粒酶活性端粒酶志贺毒素亚单位-B更多>>
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志贺毒素B(ShT-B)亚单位基因的克隆、表达与纯化
《塔里木大学学报》2005年第1期1-4,共4页喻华英 高丰 贾桂珍 吴东林 
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM-TB3 克隆质粒,得到为225bp成熟ShT-B基因片段,将其插入到经同样双酶切的pQE30表达载体中,构建了ShT-B的重组表达质粒pQE30-B2,转化到E.coliM15,经IPTG诱导后,重组质粒目的蛋白均得到表达表达蛋白约占菌体总...
关键词：亚单位基因 志贺毒素 克隆 纯化 重组表达质粒 E.COLI 基因片段 表达载体 IPTG 目的蛋白 重组质粒 物质基础 重组抗原 双酶切 ShT M15 总蛋白 可溶性 成熟 
志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式分析
《微生物学杂志》2004年第6期20-24,共5页喻华英 王景林 高丰 康琳 吴东林 赵金红 
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEMTB3克隆质粒,得到大小约为225bp的ShTB基因片段,分别将其插入到经双酶切的pQE40和pQE30表达载体中,构建了2个ShTB的重组表达质粒pQE40B3和pQE30B2,分别转化到E.coliM15,经IPTG诱导后,重组质粒目的蛋白均得到...
关键词：志贺毒素B亚单位 表达载体 表达分析 
重组CPTα的亲和纯化及其单克隆抗体的制备被引量：1
《军事医学科学院院刊》2004年第4期308-310,共3页王景林 杨利敏 吴东林 康琳 
目的 :制备抗A型产气荚膜梭菌毒素α(CPTα)单克隆抗体 (mAb)并鉴定其生物学特性。方法 :利用工程菌株E .coliM15 /pQE30 CPTα表达的重组A型CPTα带有 6个组氨酸 (6×his)标签的特性 ,经Ni NTA螯合亲和层析方法纯化后 ,用纯化的重组CP...
关键词：A型产气荚膜梭菌 毒素α 亲和纯化 单克隆抗体 
志贺毒素B(ShT-B)亚单位在两种表达载体中表达形式的分析
《中国人兽共患病杂志》2004年第8期679-683,共5页喻华英 王景林 高丰 康琳 吴东林 赵金红 
用KpnⅠ和HindⅢ双酶切pGEM -TB3 克隆质粒 ,得到为大小约为 2 2 5bp的ShT -B基因片段 ,分别将其插入到经双酶切的 pQE4 0和 pQE30表达载体中 ,构建了两个ShT -B的重组表达质粒pQE4 0 -B3 和 pQE30 -B2 ,分别转化到E .coliM15。经IPTG...
关键词：志贺毒素B亚单位 表达载体 表达分析 pQE40 pQE30 
A型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆及高效表达被引量：3
《军事医学科学院院刊》2004年第1期28-30,共3页王景林 王利春 吴东林 康琳 姜永强 
目的 :实现产气荚膜梭菌α毒素 (Clostridiumperfringensalphatoxin ,CPa)基因的克隆与表达。方法 :用PCR技术从A型产气荚膜梭菌中扩增出CPa基因 ,克隆到原核表达载体pQE30中 ,构建了重组质粒pQE30_CPa ,转化E .coliM15获得了CPa的高效...
关键词：A型产气荚膜梭茵 Α毒素 基因表达 序列分析 
志贺毒素B(ShT-B)在E.coli中的融合表达及特异性抗体制备被引量：2
《生命科学研究》2004年第1期58-62,共5页喻华英 王景林 高丰 康琳 赵金红 吴东林 
用KpnⅠ、Hind Ⅲ酶切克隆载体pGEM-ShTB3，然后亚克隆入带有二氢叶酸还原酶(DHFR)的融合表达栽体pQE40，构建重组质粒pQE40-ShTB,转化到E。coli M15中，经IPTG诱导，实现了ShTB-DHFR融合蛋白的高表达，表达量约占菌体总蛋白的21．9％...
关键词：痢疾 志贺菌 志贺毒素B 融合表达 抗体制备 二氢叶酸还原酶 重组质粒 克隆载体 
志贺毒素A/B(ShT-A/B)亚单位基因的克隆与序列分析被引量：3
《微生物学杂志》2003年第4期1-3,7,共4页喻华英 王景林 高丰 康琳 吴东林 赵金红 
应用PCR技术从Ⅰ型痢疾志贺茵(Shigella dysenteriae type Ⅰ)中,分别扩增出约895bp和225bp的成熟ShT-A,B基因片段,直接克隆至pGEM-T载体中,经蓝白斑筛选、PCR和双酶切鉴定正确后,命名为pGEM-ShTA_2和pGEM-ShTB_3。测序结果表明,插入的...
关键词：志贺毒素A/B 基因克隆 序列分析 I型痢疾志贺菌 ShT-A/B 
端粒酶活性在哺乳动物细胞中的表达被引量：1
《中国兽医学报》2003年第1期66-68,共3页阮承迈 陈守义 吴东林 李鹏 马鹤雯 马永红 张玉静 
国家自然科学基金资助项目 ( 3980 0 10 6 ;30 170 6 94)
为研究端粒酶活性在哺乳动物细胞中的激活 ,构建了端粒酶催化亚基 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和端粒酶 RNA组分 (h TR)基因的真核表达载体 ,分别在无端粒酶活性的 DK细胞株和人肝癌细胞中进行表达 ,以 TRAP-银染...
关键词：端粒酶活性 哺乳动物细胞 表达 激活 DK细胞 人肝癌细胞 
端粒酶活性检测方法的改进及dNTP浓度对端粒酶活性的影响被引量：5
《中国兽医学报》2002年第6期585-586,共2页吴东林 张玉静 李鹏 陈守义 阮承迈 
国家自然科学基金资助项目 ( 30 170 6 94)
利用重新设计的引物和反应步骤 ,对检测端粒酶活性的 TRAP反应进行了改进。与原有方法相比 ,新方法在PCR扩增过程中不改变端粒酶产物的长度和比例 ,能更准确地反映端粒酶反应产物的性质。利用这个方法 ,考察了d NTP浓度对端粒酶的影响 ...
关键词：酶活性 检测方法 dNTP浓度 端粒酶 进行性 TRAP反应 改进方法 
分子生物学技术在动物营养学中的应用与发展前景被引量：6
《生物技术通讯》2002年第1期83-86,共4页张锐 欧阳红生 张光圣 吴东林 
分子生物学理论与技术的发展和应用已渗透到生命科学的各各领域,动物营养学的发展需要在分子水平上分析及解释营养素对动物机体的生理、病理变化调控,如生长发育、新陈代谢、遗传变异、免疫与疾病等。本文综述了分子生物学在动物营养学...
关键词：分子生物学技术 动物营养 基因表达调控 应用 发展前景 
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