李少丽

作品数：10被引量：25H指数：3
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供职机构：吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室更多>>
发文主题：NA-1拯救鹅源副黏病毒新城疫病毒鹅源新城疫病毒更多>>
发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《中国兽医学报》《中国生物制品学杂志》更多>>
所获基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金更多>>
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鹅源副黏病毒致弱株的“拯救”及分子生物学鉴定被引量：1
《中国兽医学报》2011年第6期790-794,共5页张晓东 孙玉章 刘佳旭 母连志 丁壮 王昌庆 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30771606);吉林省自然科学基金项目(201015114);吉林大学农学部引进优秀人才科研启动基金项目(4305050102J6)
以本课题组前期构建的鹅源副黏病毒NA-1株的全长感染性克隆为模板设计2对引物,用overlap PCR方法将其F蛋白裂解位点处的112、115和117位碱性氨基酸定点突变成为具有典型弱毒株特征的非碱性氨基酸。随后将突变后的F基因序列替换全长感染...
关键词：鹅源副黏病毒 反向遗传 疫苗候选株 
稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系的构建及鉴定被引量：3
《中国兽医学报》2011年第1期26-28,54,共4页母连志 孙玉章 丛彦龙 李少丽 张晓东 王广美 王晓莉 丁壮 
国家自然科学基金资助项目(30771606);吉林省自然科学基金资助项目(201015114)
设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RN...
关键词：T7RNA聚合酶 克隆 VT7细胞系 病毒拯救 
猪戊型肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：6
《中国兽医学报》2010年第4期449-452,共4页邱蜜蜜 孟轲音 丁壮 叶俊青 丛彦龙 李志杰 刘美 李少丽 王昌庆 吴昊 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
根据GenBank中注册的AJ272108等序列,参考有关文献,利用引物设计相关软件在HEV ORF2片段的保守区设计并合成1对引物及探针,采用TaqMan探针建立了荧光定量PCR法。以鉴定正确的质粒为模板建立标准曲线,Ct值线性范围为14.89~27.02,相关系数...
关键词：猪戊型肝炎 实时荧光定量PCR TAQMAN探针 
鹅源副黏病毒NA-1株反向遗传操作体系的建立被引量：4
《中国兽医学报》2010年第1期6-9,28,共5页孙玉章 丁壮 孟柯音 丛彦龙 母连志 王昌庆 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
应用cRACE等方法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA5′末端和3′末端,分6段扩增得到病毒的结构基因序列,而后连接本室构建的TLH-T转录载体,构建其cDNA全长克隆。在引入分子标签和验证辅助质粒的功能后,4质粒系统共转染VT7细胞系,成功拯救出了...
关键词：鹅副黏病毒 病毒拯救 反向遗传 
利用RNAi技术靶向新城疫病毒P基因抑制其在鸡胚成纤维细胞上的复制被引量：2
《中国兽医学报》2009年第7期841-844,共4页母连志 丁壮 丛彦龙 尹仁福 刘美 王昌庆 李少丽 邱蜜蜜 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
构建了针对新城疫病毒NDV NA-1株P基因的RNAi质粒;转染质粒36 h后接种NDV,通过对病毒滴度测定、实时荧光定量PCR和细胞病变结果分析,表明其能抑制NDV在CEF中的复制和增殖。本试验为进一步研究NDV复制机理和抗病毒治疗提供了技术基础。
关键词：新城疫病毒 RNA干扰 鸡胚成纤维细胞 抑制 
鹅源副黏病毒NA-1株全长cDNA克隆的构建及鉴定被引量：3
《中国兽医学报》2009年第4期409-412,417,共5页王昌庆 丛彦龙 李少丽 丁壮 尹仁福 吴昊 刘美 邱蜜蜜 母连志 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
应用cRACE法扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA 5′末端。参照Peter等的方法设计引物,扩增鹅源副黏病毒NA-1株cDNA的3′末端。根据GenBank上发表的鹅源副黏病毒序列设计6对引物,应用RT-PCR方法分6段扩增此病毒结构基因序列,并将其连接完成后...
关键词：鹅源副黏病毒 RACE 全长CDNA 拯救 
“拯救”NA-1株鹅源副黏病毒微型基因组的构建被引量：2
《中国兽医学报》2009年第4期418-422,共5页李少丽 丛彦龙 王昌庆 丁壮 尹仁福 孙玉章 母连志 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
根据GenBank上已发表的NA-1株GPMV全序列设计并合成2对特异性引物,克隆得到GPMV的Leader及Tralier序列,与T7启动子、丁肝病毒核酶序列及T7终止子重叠PCR连接后,将连接产物克隆至改造的pVAX-1载体中,并用增强型绿色荧光蛋白基因代替GPMV...
关键词：病毒拯救 丁肝病毒核酶 微型基因组 
应用巢式PCR检测猪戊型肝炎病毒核酸及其序列分析被引量：2
《中国兽医学报》2009年第3期296-298,307,共4页邱蜜蜜 丛彦龙 丁壮 孟轲音 李志杰 尹仁福 李少丽 王昌庆 刘美 吴昊 母连志 
国家自然科学基金资助项目(30771606)
根据GenBank注册的AJ272108等序列,利用Oligo6应用软件设计内外2对引物,采用RT-PCR技术对本实验室分离的猪戊型肝炎病毒进行探索性扩增,并对测定的序列进行分析,结果用套式引物扩增出了目的条带,序列分析表明该序列属于基因Ⅳ型,并与其...
关键词：猪戊型肝炎病毒 巢式PCR 序列分析 
猪源副黏病毒JL-1株全基因获得及遗传变异分析被引量：2
《中国兽医学报》2009年第2期125-128,共4页吴昊 孟轲音 丁壮 尹仁福 毕玉海 丛彦龙 李志杰 王昌庆 刘美 邱蜜蜜 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30571375,30771606)
利用本实验室分离保存的猪源副黏病毒JL-1株来提取病毒基因组RNA。参考GenBank发表的相关禽副粘病毒Ⅰ型（Avian paramyxovirus serotype1，APMV-1）基因组序列，设计了8对特异性引物，RT—PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段，并...
关键词：猪源副黏病毒 新城疫病毒 全基因组 
新城疫病毒自然宿主细胞膜受体的鉴定被引量：4
《中国生物制品学杂志》2008年第8期651-653,共3页刘伟 丁壮 宣华 丛彦龙 宋战昀 李少丽 
国家自然科学基金资助项目(30571375)
目的鉴定鸡源副黏病毒F48E9株的自然宿主细胞膜受体。方法采用蛋白膜提取试剂盒提取鸡胚成纤维细胞膜蛋白,用改进的间接ELISA方法检测鸡源副黏病毒分离株F48E9与细胞膜的结合活性,利用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA)鉴定新城疫病毒(NDV)...
关键词：新城疫病毒 自然宿主 细胞膜受体 病毒铺覆蛋白印迹技术 
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