孙琰

作品数:6被引量:2H指数:1
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供职机构:天津医科大学基础医学院更多>>
发文主题:CRISPREZH2基因表观遗传甲基化基因更多>>
发文领域:生物学医药卫生更多>>
发文期刊:《国际生物医学工程杂志》《天津医科大学学报》《生物技术通讯》《天津医药》更多>>
所获基金:国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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采用CRISPR knockin技术实现VEGF165定点敲入HEK293T细胞系的构建
《国际生物医学工程杂志》2019年第1期39-44,共6页郭再玉 张合亮 陈谦 侯延伟 水涛 武莉莉 刘艺洁 费乔曼 黄欢 雷蕾 孙琰 孔雨 赵秀娟 韩雅婷 杨冰 张玲 
国家自然科学基金(81500170);天津市自然科学基金(15JCYBJC25400,16JCQNJC12100,16JCQNJC10300);天津滨海新区卫生局医药卫生科技项目(2011BHKZ007);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20130103);教育部留学回国人员科研启动基金资助项目;天津医科大学科学基金(2015KYZQ01).
目的构建定点敲入血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的人肾上皮细胞系HEK293T,避免由慢病毒感染等方法实现过表达时所带来的脱靶效应。方法根据EZH2基因的DNA序列设计、构建两端带有同源臂的VEGF165表达载体(pUCm-T-VEGF165质粒)和能定...
关键词:血管内皮生长因子165 CRISPR/Cas9 HEK293T细胞 
CRISPR/Cas9系统介导的EZH2基因定点敲入Hut78细胞系的构建被引量:1
《天津医药》2017年第5期449-453,共5页鲁卓林 熊显佳 吴云丹 周慧 贾军 王双林 武莉莉 刘艺洁 乔阳 杨冰 赵秀娟 王青松 韩春勇 张玲 孙琰 
国家自然科学基金资助项目(81500170,81472052);天津市自然科学基金项目(15JCYBJC25400,16JCQNJC12100,16JCQNJC10300);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20130103);教育部留学回国人员科研启动基金资助项目;天津医科大学肿瘤医院科研项目(B1516)
目的利用CRISPR/Cas9系统构建定点敲入EZH2基因的Hut78细胞系。方法构建EZH2表达载体pMD-18T-EZH2和单向导RNA(sg RNA)表达载体pSpCas9(BB)-2A-Puro-sg RNA,将两个载体共转染Hut78细胞,通过qPCR检测EZH2 mRNA的表达情况,通过Western Blo...
关键词:甲基化 EZH2基因 CRISPR/Cas9n系统 基因编辑 
大鼠EZH2基因过表达质粒以及催化亚基缺失质粒构建及鉴定
《国际生物医学工程杂志》2016年第6期326-331,共6页熊显佳 杨冰 赵秀娟 孙琰 赵建松 武莉莉 刘艺洁 张玲 
国家自然科学基金(81500170);天津市自然科学基金(15JCYBJC25400,16JCQNJC12100,16JCQNJC10300);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20130103);教育部留学回国人员科研启动基金资助项目
目的 构建特异性的大鼠EZH2过表达质粒以及EZH2催化亚基SET domain缺失质粒,并在293T细胞中评估其表达水平。 方法 提取大鼠心脏组织RNA,逆转录为cDNA,重叠PCR扩增催化亚基SET domain缺失的EZH2的cDNA,以其为模板进行PCR扩增,将PC...
关键词:EZH2 催化亚基 重组质粒 心肌肥厚 
基础医学模式生物酿酒酵母接合型的鉴定——PCR法
《天津医科大学学报》2016年第3期256-258,261,共4页刘超 韩雅婷 杨冰 孙琰 王玺 
目的:利用PCR法鉴定酿酒酵母a、α单倍体或a/α双倍体三种接合型。方法:根据酿酒酵母a、α或a/α三种接合型MAT基因座及附近序列信息,分别设计特异的寡核苷酸引物。提取酿酒酵母DNA作为模版和利用单菌落PCR法,进行特异性PCR扩增。结果:M...
关键词:酿酒酵母 接合型 MAT基因座 PCR鉴定 单菌落PCR 
利用CRISPR/Cas9n系统敲除人源SNF5基因被引量:1
《生物技术通讯》2015年第6期751-754,共4页孙琰 刘超 毛赟赟 王玺 
国家自然科学基金面上项目(81171899);国家自然科学基金青年科学基金(81100239);天津市高等学校科技发展基金(093-201301)
目的:建立敲除人源基因组中SNF5基因的CRISPR/Cas9n系统。方法:设计一对靶向人源SNF5基因第1个外显子的sg RNA,分别克隆至p X461、p X462表达载体后,转入人胚肾293T细胞,通过Western印迹检测细胞株中SNF5基因的敲除效果。结果:测序证明...
关键词:CRISPR/Cas9n系统 SNF5基因 表观遗传 
ERT2-Cre诱导的Rosa26R-YFP报告基因系统标记小鼠造血干祖细胞的条件和效率检测
《国际生物医学工程杂志》2014年第5期266-270,I0003,I0004,共7页罗琦 尹洁 孟歆怿 杨冰 雷蕾 孙琰 李丹丹 王瑾 王玺 何景华 
国家自然科学基金资助项目(81171899)
目的 探索ERT2-Cre诱导的黄色荧光蛋白(YFP)报告基因系统标记小鼠造血干祖细胞的条件和效率.方法 通过基因型分型的方法,从Rosa26R-YFP小鼠与ERT2-Cre小鼠杂交得到的后代中,筛选出YFP及ERT2-Cre双阳性转基因杂交小鼠;采用免疫磁珠法...
关键词:造血系统 造血干祖细胞 c-kit+细胞 ERT2-Cre Rosa26R-YFP报告基因系统 
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