pGensil-2-DPPA2 siRNA重组质粒的构建鉴定及其抑制胃癌细胞中多能性相关基因2表达的研究  

作　　者：徐纪伟[1] 孙丹华[1] 陈旭东[1] 

机构地区：[1]漯河医学高等专科学校基础医学部,河南漯河462000

出　　处：《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》2020年第9期00360-00361,364,共3页

基　　金：河南省高等学校青年骨干教师培养计划项目(2017GGJS285);河南省科技厅科技攻关项;(182102310083);漯河市科技创新项目(20181000008);河南漯河医学高等专科学校创新创业发展能力提升工程项目(2019LYZKYZD008)。

摘　　要：构建靶向DPPA2基因构建的特异性siRNA重组质粒,筛选出能高效抑制DPPA2基因表达的siRNA重组质粒。 方法 设计并构建针对DPPA2的特异性siRNA重组质粒,经酶切和DNA测序鉴定后,用脂质体转染法将沉默基因导入SGC-7901细胞中,用实时荧光定量PCR方法和Western Blot方法分别检测转染前后DPPA2 mRNA水平和DPPA2蛋白表达水平。 结果RT-PCR结果显示DPPA2 mRNA在SGC7901细胞中呈阳性表达,相对表达量68±7%,空载体转染组的相对表达量为61±9%,DPPA2基因沉默组的相对表达量为22±4%。WesternBlot结果显示转染siRNA组与未转染组和空载体转染组之间有显著性差异,蛋白抑制率高达75.5%。结论 合理设计的特异性siRNA重组质粒可大幅度下调DPPA2 mRNA水平,能有效抑制DPPA2蛋白表达。

关 键 词：DPPA2 小干扰RNA 胃癌 质粒载体 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]