重组人碱性成纤维细胞生长因子肽图分析方法的优化  

作　　者：石俊芳 滕凌 谭雅超 周婷 姚晓林 

机构地区：[1]朗肽生物制药股份有限公司,广东佛山528000

出　　处：《中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生》2023年第12期78-80,共3页

摘　　要：随着重组人碱性成纤维细胞生长因子在临床应用越来越广泛,肽图分析是其质量控制的主要方法,探索并确定重组人碱性成纤维细胞生长因子的最佳酶解条件,建立酶解更完全、特异性更强的适用于重组人碱性成纤维细胞生长因子的HPLC肽图的分析方法尤为迫切。方法 采用蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法,以2M UA溶液作为酶解缓冲液,加入酶解比例蛋白质:酶w/w =20:1的Trypsin,于37 ℃酶解16 h终止反应。通过梯度洗脱,采用超高效液相色谱质谱对各色谱峰进行目标肽段的分离和鉴定。结论 重组人碱性成纤维细胞生长因子基本完全酶解,酶解时间为16 h,缩短了8 h,酶解比例为蛋白质:酶w/w =20:1,酶量大大减少,节约实验成本,酶解的完全性与有效性大幅提高,产生的10个特征峰重复率高,特征肽段理论塔板数大于2000,特征肽段与相邻峰之间的分离度大于1.2,且色谱图基线平稳。

关 键 词：重组人碱性成纤维细胞生长因子 酶解条件 肽图分析 反相高效液相色谱法 

分 类 号：R725[医药卫生—儿科]