肝癌细胞中WIF-1的甲基化状态分析  

Analysis of methylation of WIF-1 gene in liver cancer cell lines

作　　者：程勤[1] 金洁[2] 于彬[2] 万晓桢[2] 游海燕[2] 舒惠群[2] 姚根富[2] 覃文新[2] 

机构地区：[1]复旦大学上海医学院,上海200032 [2]上海交通大学肿瘤研究所,上海200032

出　　处：《复旦学报（医学版）》2007年第6期843-847,共5页Fudan University Journal of Medical Sciences

基　　金：国家重点基础研究发展计划(2002CB513104)

摘　　要：目的探讨WIF-1基因在肝癌细胞中的甲基化状态及其与蛋白表达的关系,并初步研究了WIF-1与肝癌发生发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)和测序方法分析了9种肝癌细胞系中WIF-1启动子区的甲基化状态,用RT-PCR检测了其mRNA的表达。用去甲基化药物5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肝癌细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果6种肝癌细胞中检测到异常的甲基化,甲基化率为66.7%。在用5-Aza-CdR处理细胞后,WIF-1表达缺失的肝癌细胞系不同程度地恢复了表达。MTT法分析发现WIF-1对SMMC-7721(7721)细胞生长有较为显著的抑制效果。结论推断WIF-1启动子区频繁甲基化的现象可能是它在肝癌中表达沉默的主要机制,并在肝癌的发生发展起作用。Purpose To investigate the methylation of WIF-1 gene in liver cancer cell lines and the relationship between WIF-1 methylation and expression,also study the role of the WIF-1 gene in the genesis of liver cancer.Methods We used methylation-specific PCR(MSP) and bisulfite sequencing analysis technique to detect methylation status of WIF-1 promoter region in 9 different liver cancer cells,and applied RT-PCR technique to detect their mRNA expression level.We also treated the liver cancer cell lines with demethy...

关 键 词：WNT信号通路 WIF-1 DNA甲基化 肝癌 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤]