水稻基因组DNA的RAPD扩增研究  

Study on RAPD Reaction System for the Rice

作　　者：朱必凤[1] 吴成钢[2] 廖朝晖[1] 刘安玲[1] 刘主[1] 

机构地区：[1]韶关学院英东生物工程学院,广东韶关512005 [2]南昌大学生命科学与食品工程学院,江西南昌343000

出　　处：《韶关学院学报》2002年第12期11-16,共6页Journal of Shaoguan University

基　　金：广东省自然科学基金资助项目 (0 0 14 4 6)

摘　　要：通过对水稻RAPD反应条件比较研究 ,建立了对除草剂敏感致死水稻RAPD的最适反应体系和反应扩增程序 ,即在 2 5μl反应体系中 ,含 1 0mMTris-HCl(pH8 0 ) ,1 0mMKCl,8mM (NH4) 2 SO4,0 0 5 %NP - 4 0 ,2 0mMMgCl2 ,0 1mM (each)dTNPs,2 0ng引物 ,2 0ng基因组DNA ,1 5U的Taq酶 反应扩增程序为 :94℃变性 2min;扩增 40个循环 ,每循环包括 :94℃变性 1 0s,40℃退火 30s,72℃延伸 1 5min;最终延伸The optimal reaction system was structured by studying the factors affecting the rice RAPD reaction The system was 10 mmol/L Tris-HCl (pH8 0), 10 mmol/L KCl, 8 mmol/L (NH 4) 2SO 4, 0 05% NP-40, 2 0 mmol/L MgCl 2, 0 1 mmol/L dTNPs for each nucleotide, 20 ng prime, 20 ng rice DNA, and 1 5 U Taq polymerase in total 25μl The process of reaction was 95℃ for 120 s in the beginning, then 94℃ for 10 s, 40℃ for 30 s, 72℃ for 90 s, for 40 cycles, 72℃ for 300 s in the end

关 键 词：水稻 基因组DNA RAPD 反应系统 

分 类 号：Q781[生物学—分子生物学]