PFP、GrB的共表达杀伤人喉癌Hep-2细胞的体外研究  

Cytotoxic effect of perforin protein and granzyme B co-expression on human laryngeal carcinoma Hep-2 cells in vitro

作　　者：李秀英[1] 夏良平[2] 赖延东[3] 

机构地区：[1]暨南大学药学院,广州510632 [2]中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室,广州510080 [3]广州医学院化学致癌研究所,广州510182

出　　处：《现代免疫学》2008年第3期224-228,共5页Current Immunology

基　　金：广东省医学科研课题资助项目(B2007100);广东省自然科学基金资助项目(5300804)

摘　　要：为探讨穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GrB)共表达对人喉癌(Hep-2)细胞生长的抑制及其诱导该细胞的凋亡作用,采用RT-PCR的方法从人的喉癌组织浸润淋巴细胞中扩增全长PFP、GrB的cDNA片段,构建共表达重组体pVAX1-PIG,并将其转染入人的Hep-2细胞株中。收集转染后的Hep-2细胞,采用软琼脂集落形成实验、MTT法、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞仪(FCM)检测分析各组人Hep-2细胞的生长抑制及其凋亡情况。结果显示pVAX1-PIG转染组的集落形成数目比空白对照组与pVAX1转染组明显减少(P<0.05),MTT检测结果显示对照组细胞生长速度比pVAX1-PIG转染组要快。TUNEL染色、FCM法检测均显示pVAX1-PIG转染组的Hep-2细胞大量凋亡且其凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。因此,PFP、GrB的共表达能够抑制人Hep-2细胞的生长并且可以诱导该细胞的凋亡。To investigate the potential roles of human perforin protein(PFP) and granzyme B(GrB) on the growth and induction of apoptosis of Hep-2 cells,the full-length cDNA fragments of PFP and GrB genes of the infiltrated lymphocytes from throat cancer tissues were amplified and then subcloned into plasmid pVAX1 to construct eukaryotic expression plasmid pVAX1-PIG.The recombinant pVAX1-PIG was transfected to Hep-2 cell line by lipofectamine 2000.The inhibitory effect of co-expression on the growth of Hep-2 cells was...

关 键 词：穿孔素 颗粒酶B 细胞增殖 细胞凋亡 

分 类 号：R739.65[医药卫生—肿瘤]