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机构地区:[1]华中科技大学附属同济医院神经内科,湖北武汉430030
出 处:《中国现代医学杂志》2008年第21期3073-3077,3082,共6页China Journal of Modern Medicine
基 金:国家自然科学基金(No:30700244)
摘 要:目的观察纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养对(matrix metalloproteinases9,MMP9)蛋白及转录水平表达的动态变化。方法大鼠脑血管内皮细胞分离后培养,融合良好后,与不同溶度的纤维蛋白共培养,应用酶联免疫方法(ELISA)定量检测MMP9抗原浓度和Real-timePCR半定量检测MMP9 mRNA。结果纤维蛋白可以特异性诱导大鼠脑血管内皮细胞表达MMP9;不同浓度的纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24h,1.0mg/mL上清液组的MMP9抗原浓度显著增高(P<0.001);1.0mg/mL纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞分别培养0、2、4、8、24和48h,MMP9浓度在共培养2h已经升高,8h时显著升高,在24h仍然保持在显著升高表达水平(P<0.005),48h有所下降;不同浓度的胶原蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养24h引起MMP9抗原浓度轻度增高,但是在高浓度组明显低于对应浓度的纤维蛋白组引起的MMP9抗原浓度增高(P<0.05);纤维蛋白与大鼠脑血管内皮细胞共培养,转录水平检测提示,MMP9 mRNA的上调呈现出剂量和时间依赖性模式。结论纤维蛋白是大鼠脑血管内皮细胞特异性激活剂,可以特异性的上调MMP9表达,在转录水平和蛋白水平均呈现为剂量和时间依赖性模式。Objective To investigate the kinetics of matrix metalloproteinases9(MMP9) protein and mRNA ex-pressions in the co-culture of rat brain Vascular Endothelial Cells(RBVEC) with fibrin.MethodsThe MMP9 concentration were measured by rat MMP9 ELISA kit and the MMP9 mRNA were measured by Real-time PCR after development an in vitro model of in situ fibrin polymerization on RBVEC.ResultsFibrin could induce MMP9 expression.The MMP9 antigen concentration increased significantly in 1.0 mg/mL media groups compared to th...
分 类 号:R743.31[医药卫生—神经病学与精神病学]
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