人PFP、GrB共表达诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的研究  

Apoptosis of human Hep-2 cells induced by pore-forming protein and granzyme B

作　　者：李秀英[1] 夏良平[2] 赖延东[3] 

机构地区：[1]暨南大学药学院基因组药物研究所 [2]中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室 [3]广州医学院化学致癌研究所

出　　处：《免疫学杂志》2009年第2期150-153,157,共5页Immunological Journal

基　　金：广东省医学科研课题(B2007100);广东省自然科学基金项目(5300804)资助

摘　　要：目的探讨人穿孔素(PFP)、颗粒酶B(GrB)共表达是否可以诱导人的喉癌细胞系Hep-2的凋亡及其作用的机理。方法利用脂质体2000将PFP、GrB共表达载体pVAX1-PIG(即pVAX1-PFP-IRES-GrB)转染人喉癌Hep-2细胞,采用荧光染料Hoechst33342法、流式细胞仪(FCM)检测、透射电镜观察Hep-2细胞的凋亡情况。以激光共聚焦显微镜检测重组载体转染后的Hep-2细胞内[Ca2+]i浓度的变化,并探讨其作用机理。结果pVAX1-PIG转染组的Hep-2细胞大量凋亡且其凋亡率显著高于对照组(P<0.05),透射电镜研究显示单个Hep-2细胞内亦出现凋亡的特征。Hep-2细胞内[Ca2+]i的浓度发生了变化,且由FI值增大可知细胞胞浆内[Ca2+]i的浓度升高。结论PFP、GrB共表达能够诱导人Hep-2细胞的凋亡,且凋亡的发生与细胞胞浆内[Ca2+]i的浓度升高有关。Objective To investigate the effect of pore-forming protein(PFP)and granzyme B(GrB)on apoptosis of human Hep-2 cells and the mechanisms.Methods The eukaryotic co-expression recombinant pVAX1-PIG was transfected into Hep-2 cells.The apoptosis of Hep-2 cells were identified by the assays of electronic microscopy,flow cytometry,and Hoechst33342 staining.The intracellular Ca2+i concentration in Hep-2 cells was detected by the assays of calcium fluorescent probe Fluo-3/AM and laser confocal microscopy.Results He...

关 键 词：凋亡 激光共聚焦显微镜技术 透射电镜 流式细胞仪分析 

分 类 号：R739.65[医药卫生—肿瘤]