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作 者:邓洪新[1] 杨晓娟[1] 邓光兵[1] 陈静[1] 潘志芬[1] 余懋群[1]
出 处:《四川大学学报(自然科学版)》2000年第S1期38-42,共5页Journal of Sichuan University(Natural Science Edition)
摘 要:作者对在小麦DNA的RAPD扩增中 ,Mg2 + 浓度、TaqDNA聚合酶和模板DNA的用量对扩增结果的影响进行了探讨 ,研究结果发现 ,在Mg2 + 浓度为 2 .0mmol/L ,TaqDNA聚合酶为 2U/2 5μL ,模板DNA为 15~ 2 0ng/2 5μL时 ,对小麦DNA的RAPD扩增结果较好 .实验共使用了 10 0个随机引物 ,对抗禾谷孢囊线虫基因供体亲本易变山羊草、抗性近等基因系 (near isogenicline,NILs)E- 10 和回交亲本寄主品系Lutin进行RAPD扩增 ,发现有 3个引物 :OPB12 ,OPB14和OPB11的扩增产物 ,在抗感NILs材料间揭示了多态性 ,但只有引物OPB12在 4次以上重复中 ,获得稳定相同的结果 ,其多态标记为OPB12 - 1350 ,它只在NILs和抗性供体亲本中出现 ,而回交亲本中未出现 .初步认为该多态性分子标记OPB12 - 1350The factors that influencing RAPD (Random Amplified polymorphic DNA) reaction, including the concentration of Mg 2+ ,Taq DNA polymerase and template DNA were examined in the study. The results indicated that the optimum RAPD condition for wheat were:Mg 2+ concentration 2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 2U,template DNA concentration 15~20ng in 25μL reaction system. The RAPD analysis was made in CNN (cereal cyst nematode) resistance gene near is...
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