过敏毒素C5a通过Calpain途径致VEC凋亡损伤  

rhC5a induces apoptosis by stimulating and regulating the expression of calpain in endothelial cells

作　　者：胡厚祥[1] 李保胜[2] 刘利[1] 陈彩宇[2] 吕凤林[2] 

机构地区：[1]川北医学院附属医院心内科 [2]第三军医大学大坪医院野战外科研究所一室

出　　处：《免疫学杂志》2009年第4期424-427,共4页Immunological Journal

基　　金：四川省科委项目;四川省教委项目(2005A086);国家自然科学基金项目(30571748)

摘　　要：目的探索C5a是否与LPS、毒源性大肠杆菌O157产生的外毒素—V毒素(verotoxin)具有相似的可以导致血管内皮细胞(VEC)凋亡的作用。方法流式细胞仪检测细胞凋亡发生率,首先探讨rhC5a刺激的质量浓度,分别为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.5μg/mL刺激12 h检测VEC凋亡发生率;在rhC5a质量浓度均为1μg/mL条件下,时间分别为2 h、6 h、12 h、18 h和24 h,检测VEC凋亡发生率。Western blot方法检测凋亡相关蛋白。结果在rhC5a质量浓度为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.5μg/mL刺激12 h诱导的凋亡发生率分别为4.58%、7.87%、17.94%和19.03%。在确定rhC5a质量浓度1μg/mL的条件下,VEC发生凋亡呈时间依赖关系,在2 h、6 h、12 h、18 h和24 h的时相,细胞凋亡发生率分别为4.58%、12.78%、18.12%、19.08%和19.96%。rhC5a刺激VEC细胞,calpain-2蛋白表达呈时间依赖性,而calpain-1蛋白的表达为浓度依赖性。结论C5a可以导致VEC细胞发生凋亡,calpain参与了这类细胞的凋亡进程。Objective To investigate the apoptotic effects of C5a on vascular endothelial cells(VECs).Methods The VECs were treated with rhC5a at different concentration(0.2,0.5,1 and 1.5 μg/mL,respectively) for 12 hours or with 1 μg/mL rhC5a at different time(0,2,6,12,18,and 24 h).Flow cytometry analysis with Annexin V/PI staining was used to identify the undergoing apoptosis and necrosis of VECs after rhC5a treatment.The calpain-1 and calpain-2 proteins were detected with Western blotting.Results The percentage of ap...

关 键 词：内皮细胞 凋亡 rhC5a CALPAIN 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]