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机构地区:[1]陕西师范大学生命科学学院,陕西西安710062
出 处:《陕西师范大学学报(自然科学版)》2009年第6期71-76,共6页Journal of Shaanxi Normal University:Natural Science Edition
基 金:陕西省自然科学基础研究计划项目(ST08-ZT09);西安市科技局社会发展研发项目(YF07188)
摘 要:针对ANXA2 mRNA序列设计4个靶点的小干扰RNA序列和一条阴性对照序列,构建表达这些序列的pU6H1-GFP重组质粒,导入Caco-2细胞,在不同时间点检测ANXA2 mRNA水平、蛋白水平、细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化.研究了膜联蛋白A2(ANXA2)基因表达水平对人结直肠癌细胞系Caco-2增殖、凋亡以及迁移能力的影响.结果显示,所构建的4个重组质粒对Caco-2细胞ANXA2基因的表达均发挥了不同程度的干扰作用,其中以1号靶点的干扰效果最强,转染后72 h抑制率达70.0%,ANXA2蛋白水平显著下降,Caco-2细胞的增殖力和迁移能力受到显著抑制,凋亡细胞数量显著增加(P<0.01).ANXA2表达水平与人结直肠癌细胞的生长、增殖、凋亡及迁移能力密切相关,抑制ANXA2的表达可抑制Caco-2细胞的增殖和迁移能力,促进细胞凋亡,机理可能是ANXA2参与了细胞的DNA合成以及肌动蛋白的调控.To investigate the effects of ANXA2 knockdown on cell proliferation,apoptosis and migration of Caco-2 cells,four siRNAs targeting ANXA2 were designed and cloned,then the recombinant plasmids were transfected into Caco-2 cells,the changes of ANXA2 expression levels were detected by RT-PCR and immunocytochemistry respectively.The results showed that the four siRNAs,especially site 1 siRNA,could inhibit the expression of ANXA2 effectively.Over 70% ANXA2 expression was inhibited at 72 h post transfection.The re...
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