FHIT基因表达对多西紫杉醇诱导胃癌细胞凋亡的实验研究  

Docetaxel in combination with FHIT in treatment of human gastric cancer cells:an experimental study

作　　者：李建华[1] 许洪伟[1] 张春清[1] 孔凡国[1] 罗琼[1] 

机构地区：[1]山东大学附属省立医院消化内科,济南250021

出　　处：《山东大学学报（医学版）》2009年第8期29-32,36,共5页Journal of Shandong University:Health Sciences

基　　金：山东省自然科学基金资助项目(2004ZX05)

摘　　要：目的探讨外源性FHIT基因的表达对多西紫杉醇(DOC)诱导人胃癌细胞株(MGC-803)凋亡的影响及其分子机制。方法用脂质体将包含有外源性FHIT基因的重组真核表达质粒转染胃癌细胞MGC-803,获得稳定表达重组质粒pRcCMV-FHIT的细胞株(已由山东大学附属省立医院中心实验室成功构建),Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;采用MTT法检测不同浓度(1.0、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/L)及不同时间(24、48、72 h)下多西紫杉醇对MGC-803细胞的抑制率并选择最佳浓度和作用时间;采用流式细胞术检测FHIT转染和DOC单独及联合作用后的细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测干预前后cleaved-Caspase3的蛋白表达。结果获得稳定表达FHIT基因的胃癌细胞株;DOC对MGC-803细胞具有抑制作用,且浓度为20 mg/L、时间为48 h时最明显;DOC+pRcCMV-FHIT组细胞的凋亡水平(65.54%)较阴性对照组(3.27%)、pRcCMV组(3.55%)、pRcCMV-FHIT组(13.94%)、DOC组(44.13%)、DOC+pRcCMV(45.29%)组明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.05);DOC+pRcCMV-FHIT组细胞的cleaved-Caspase3蛋白表达较其它各组明显增强。结论FHIT基因表达与DOC能够协同促进胃癌细胞的凋亡,这可能与二者能够协同上调Caspase-3蛋白表达相关。Objective To investigate the effect and molecular mechanisms of FHIT expression on apoptosis of human gastric cancer cells(MGC-803) induced by docetaxel(DOC).Methods Recombination eukaryotic expressive plasmids with exogenous FHIT were transfected into MGC-803 by liposomes.The cell line which acquired a stable expression of recombinant plasmid pRcCMV-FHIT was successfully built by the Central Laboratory of the Provincial Hospital Affiliated to Shandong University.Exogenous FHIT protein expression was assaye...

关 键 词：胃肿瘤 脆性组氨酸三联体 基因表达 多西紫杉醇 细胞凋亡 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]