Arg引入“Ser/Thr”平面对木聚糖酶XynⅡ热稳定性的影响  

Effect of engineering of multiple arginines into the Ser/Thr surface of xylanase XynⅡ on thermostability

作　　者：周晨妍[1] 王武[2] 邬敏辰 

机构地区：[1]新乡医学院生命科学技术系河南省医学遗传学与分子靶向药物重点实验室,河南新乡453003 [2]江南大学生物工程学院,江苏无锡214122 [3]江南大学医药学院,江苏无锡214122

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2010年第1期46-52,共7页Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition)

基　　金：国家"863"高新技术研究与发展计划项目(2006AA10Z305)

摘　　要：【目的】为了提高来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)的高比活木聚糖酶XynⅡ的热稳定性,对其热稳定性影响因素进行改造。【方法】对木聚糖酶XynⅡ进行同源建模和序列比较,在XynⅡ的"Ser/Thr"平面引入精氨酸的四点诱变和五点诱变,对酶的热稳定性进行改造。【结果】获得的2个突变酶在热稳定性上较野生型酶均有不同程度提高,突变酶ST4、ST5的最适温度分别由原酶的50℃提高为52和55℃。55℃保温15 min,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的20%提高为65%和75%;保温1 h,ST4、ST5的残留酶活性由原酶的15%提高为50%和65%。【结论】突变酶ST4、ST5在保持了XynⅡ优良性质的基础上,进一步提高了其热稳定性,具有更好的应用价值。【Objective】 The research was done in order to increase the thermotolerance of xylanase XynⅡ from Aspergillus usamii.【Method】 A homology modeling of XynⅡ was constructed by SWISS-MODEL and BLAST.Replacing several serine and threonine residues on the Ser/Thr surface of XynⅡ with arginines effectively increased the thermostability of the enzyme.【Result】 The substitution of Ser and Thr residues on the Ser/Thr surface of the enzyme with four(ST4) or five arginines(ST5) led to an increase in optimal temperature o...

关 键 词：宇佐美曲霉 木聚糖酶 热稳定性 定向诱变 “Ser/Thr”平面改造 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]