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机构地区:[1]山东理工大学生命科学学院,山东淄博255049
出 处:《生命科学仪器》2009年第9期-,共5页Life Science Instruments
基 金:山东省教育厅科研基金(J04C08)
摘 要:Y-21是从山东省淄博市蔬菜温室中分离到的一株细菌,通过室内平板对峙试验,对番茄灰霉病菌具有较强的拮抗性。本研究通过形态观察、生理生化反应和分子生物学方法对这株细菌进行系统鉴定。显微镜观察菌株形态为杆状;有芽孢;革兰氏染色呈阳性。采用经典的基因组提取方法提取基因组DNA,以其为模板,利用引物63F、1494R扩增16S rRNA基因,回收16SrRNA基因的PCR产物并与T载体连接,通过热激法将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,利用蓝白斑筛选,挑出白斑,提取质粒,通过蓝白斑质粒的电泳图比对和质粒的PCR检测确定阳性克隆,将阳性克隆菌株送样测序。将测序结果输入BLAST进行比对,发现Y-21属于假单胞菌属,然后对其构建系统发育树。Y-21 has a stronger inhibition effect on Botrytis cinerea.It was identified as Bacillus subtilis based on the results of morphologic characteristics,physiological and biochemical properties and phylogenetic analysis of 16S rDNA sequence.Y-21 is the rod-shaped bacteria,it is Bacillus,gram stain Y-21 is negative.To identify the bacteria by these genes.In this paper,a classic Genome extracting methods is used to extract the genome of the bacteria.Primers 63f,1494r are used to amplify the gene of 16SrRNA the PC...
关 键 词:拮抗细菌 生理生化特性 16SRRNA基因 菌种鉴定
分 类 号:S436.412[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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