靶向性抗肿瘤融合蛋白-表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白在细胞内的转运及对胞外信号调节激酶磷酸化的影响  

Trafficking Pathway and Affectivity on Extracellular Signal-regulated Kinase Phosphorylation of Anti-tumor Fusion Protein of Epidermal Growth Factor-Adenovirus Early Region 4 Open Reading Frame 4 Protein

作　　者：王存琳[1] 陈虹[1] 马晓骊[1] 王欣[1] 黄秉仁[1] 

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京100005

出　　处：《中国医学科学院学报》2009年第6期674-678,797-798,共7页Acta Academiae Medicinae Sinicae

基　　金：国家高技术研究发展计划项目(863项目)(2008AA0Z118)~~

摘　　要：目的探讨经表皮生长因子受体介导进入肿瘤细胞的融合蛋白表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白(EGF-E4orf4)在细胞内的转运及对胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响。方法采用间接免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在MDA-MB-231和BGC823细胞中的转运和代谢特点,Western blot检测融合蛋白引起的细胞内ERK磷酸化水平的改变。结果融合蛋白可在细胞内累积,向细胞核周围聚集,并与细胞早期内体和晚期溶酶体共定位;融合蛋白能快速触发细胞内ERK发生磷酸化,磷酸化水平在10 min时最强,之后逐渐回落至刺激前水平,活化ERK的能力较表皮生长因子弱。结论融合蛋白EGF-E4orf4在细胞内经内体-溶酶体途径发生缓慢降解;在MDA-MB-231和BGC823细胞中,融合蛋白的作用特点存在明显差异,可能是导致融合蛋白对二者抑瘤率不同的原因之一。Objective To investigate the intracellular trafficking pathway of fusion protein epidermal growth factor-adenovirus early region 4 open reading frame 4 protein(EGF-E4orf4) internalized via epidermal growth factor(EGF) receptor and its affectivity on extracellular signal-regulated kinase(ERK) phosphorylation.Methods MDA-MB-231 and BGC823 cells were incubated with fluorescein isothiocyanate-EGF-E4orf4 or EGF at different time points.The specific molecular mark of early endosome or late lysosome was labeled by...

关 键 词：融合蛋白-表皮生长因子-腺病毒早期转录区4第4编码蛋白 内体-溶酶体途径 胞外信号调节激酶 

分 类 号：R73-3[医药卫生—肿瘤]