正常人结肠上皮细胞体外培养和鉴定  

作　　者：张安平[1] 刘宝华[1] 张连阳[1] 王亚旭[1] 李春穴[1] 

机构地区：[1]中国人民解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所普通外科,重庆市400042

出　　处：《世界华人消化杂志》2004年第8期1966-1968,共3页World Chinese Journal of Digestology

摘　　要：目的:探讨正常人肠上皮细胞(intestinal epithelial cells, IEC)的分离、体外培养方法,为研究IEC以及与IEC相关疾病建立合适的细胞模型. 方法:正常结肠黏膜取自外科手术的大肠恶性肿瘤患者距肿瘤10 cm的结肠组织,联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化分离IEC,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内,根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异并运用胶原酶来纯化IEC,通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定. 结果:联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶消化1 h可分离出健全绒毛隐窝单位,2 wk左右细胞可铺满整个玻片.免疫细胞化学检测该细胞为阳性细胞,纯度高. 结论:联合运用Ⅰ型胶原酶和嗜热菌蛋白酶,可分离培养出高纯度未凋亡的ICE.

关 键 词：正常人 Ⅰ型胶原 联合 结肠上皮细胞 嗜热菌蛋白酶 体外培养 酶消化 玻片 DMEM 纯化 

分 类 号：R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]