γ-干扰素对卵巢癌细胞株血管内皮生长因子表达的影响  

Down-regulation of vascular endothelial growth factor expression in ovarian cancer cell line SKOV3 by interferon-gamma

作　　者：林仿芳[1] 陈怀增[1] 谢幸[1] 叶大风[1] 

机构地区：[1]浙江大学医学院附属妇产科医院妇科

出　　处：《中华妇产科杂志》2003年第3期150-153,i001,共5页Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology

摘　　要：目的　研究γ 干扰素 (IFN γ)对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法　将IFN γ以不同浓度 (1、10、10 0、10 0 0、10 0 0 0U/ml)、不同作用时间 (12、2 4、3 6、48、60h)作用于SKOV3细胞 ,在相差显微镜下观察细胞形态的变化 ;用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法测定细胞增殖 ;用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)半定量法测定细胞VEGFmRNA含量 ;用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)和免疫细胞化学方法测定细胞培养上清液和细胞浆中VEGF蛋白含量。结果　 (1) 10 0 0U/mlIFN γ作用后SKOV3细胞形态无明显变化。 (2 )不同浓度 (1、10、10 0、10 0 0、10 0 0 0U/ml)IFN γ作用不同时间 (12、2 4、3 6、48、60h)后 ,SKOV3细胞增殖活性比较 ,差异无显著性 (P>0 0 5 )。 (3 )IFN γ作用后 ,SKOV3细胞VEGFmRNA和蛋白含量明显减少 (P <0 0 1)。IFN γ浓度达到 10U/ml后起作用 [抑制率为 (5 2± 0 6) % ],其后随着浓度的增高 ,IFN γ对VEGFmRNA的抑制作用增强 ,在浓度达到 10 0 0U/ml时 ,抑制作用达到高峰 [抑制率为 (2 1 6± 2 6) % ]。但IFN γ的抑制作用并不存在时间依赖关系 ,用药 2 4h后出现抑制作用 ,并立即达到高峰 [抑制率为 (2 2 4± 1 7) % ]。Objective To determine whether interferon gamma(IFN γ)inhibit the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF) in ovarian cancer cell line SKOV3 with the level of mRNA and protein Methods Cultured SKOV3 was treated by IFN γ with different concentration and time The morphological changes of SKOV3 treated by IFN γ through microscope and proliferation by methyl thiazolyl tetrazolium(MTT) The expression of VEGF mRNA in SKOV3 culture was determined by relative quantitative reverse transcription polymerase chain reaction The VEGF protein level in supernatants was determined by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) and in cytoplasma by immunocytochemical staining Results There is a small changes in shape on SKOV3,but no alter of cell proliferation during treating with different concentration and time Expression of VEGF mRNA and protein decreased with the INF γ concentration increasement, but no time effect pattern exist. The effect peak appeared when the concentration was 1 000 U/ml Conclusion IFN γ can inhibit the expression of VEGF in ovarian cancer cell line SKOV3 with the level of mRNA and protein

关 键 词：IFN-Γ SKOV3 血管内皮生长因子 VEGF 抑制作用 Γ-干扰素 表达 细胞 RNA 性比 

分 类 号：R737.31[医药卫生—肿瘤]