Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选  

作　　者：王震[1] 孟宪敏[1] 曹慧青[1] 刘冬青[1] 冯艳[2] 尤昕[3] 王茵[2] 郭莲军[2] 屈伸[4] 

机构地区：[1]中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心,北京100037 [2]华中科技大学同济医学院基础医学院,武汉430030 [3]延边大学医学院附属医院检验科,延吉133000 [4]华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉430030

出　　处：《科学通报》2004年第21期2173-2177,共5页Chinese Science Bulletin

摘　　要：为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质,对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验,并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验.结果发现,在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力.进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和胰蛋白酶抑制物重链前体(ITIH).通过免疫共沉淀实验,验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用.通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白,并且能够同Filamin相结合.由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,起到了参与细胞黏着斑形成的过程.

关 键 词：肌动蛋白结合蛋白 相互作用蛋白 白质 心肌 实验 相关蛋白 新基因 阳性克隆 结构域 酵母双杂交 

分 类 号：Q51[生物学—生物化学]