单疱疹病毒结构蛋白BVP22的亚细胞定位及在细胞间的穿梭  

作　　者：关丽英[1] 汪蕙[1] 赖百塘[1] 

机构地区：[1]北京市结核病胸部肿瘤研究所

出　　处：《结核病与胸部肿瘤》2004年第3期202-207,共6页Tuberculosis and Thoracic Tumor

摘　　要：目的 检测BVP22蛋白在细胞中的定位及穿梭，为其应用于肺癌的基因治疗提供依据。方法 Lipofectamin介导细胞转染，G418筛选，建立单克隆细胞系。荧光显微镜观察荧光以确定BVP22在细胞中的表达及定位。流式细胞分选记数、免疫组化染色检测BVP22在细胞中的穿梭。结果 获转染单克隆细胞系pEYFP-801D和pEYFP-BVP22-801D。BVP22在细胞中定位表现出多相性，在大多数细胞中为胞核定位，少数细胞为胞质丝状定位，BVP22与染色体结合通过有丝分裂到达子细胞的细胞核中。与801D以一定比例混合培养，流式细胞记数显示，在0h、24h、48hYFP阳性细胞的比例无明显增加。免疫组化染色显示二者混合培养24h后，儿乎所有的细胞的细胞核都染成了棕黄色。结论 BVP22主要定位于细胞核中，其胞核定位与细胞分裂和其在细胞间穿梭相关。其穿梭效果通过免疫组化染色检测到，混合培养24h BVP22即能够从pEYFP-BVP22-801D细胞穿梭到母系801D细胞的细胞核中。

关 键 词：流式细胞 免疫组化染色 细胞核 疱疹病毒 单克隆 结构蛋白 细胞系 D细胞 肺癌 细胞转染 

分 类 号：R735[医药卫生—肿瘤] R737[医药卫生—临床医学]