人可溶性APRIL(sAPRIL)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达  

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作  者:戴双双[1] 李蓉芬[1] 杨朝辉[1] 彭家和[1] 何风田[1] 

机构地区:[1]第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆400038

出  处:《世界肿瘤杂志》2004年第4期318-322,共5页Tumour Journal of the World

摘  要:目的 克隆并表达人可溶性增殖诱导配体(sAPRILA探索其在多种肿瘤细胞的增殖和存活以及促肿瘤形成中的作用。方法 从GENBANK中查找人APRIL蛋白(编号:075888)序列,取其部分胞外(sAPRIL)序列设计引物,用RT-PCR从扁桃体总RNA中扩增出人sAPRIL基因,测序后将克隆载体经酶切并构建表达载体,在大肠杆菌中表达,纯化蛋白后进行细胞学实验。结果 经克隆测序后进行同源比较,证实所克隆的基因即为sAPRIL在大肠杆菌中表达量达43.6%,获得纯化蛋白,3H-TdR掺入实验表明sAPRIL有明显刺激肿瘤细胞增殖的作用。结论 APRIL有明显促进肿瘤的形成及肿瘤细胞的增殖与存活的作用,该基因的克隆与表达为深入研究sAPRIL的功能奠定了基础。

关 键 词:表达 基因 克隆 蛋白 大肠杆菌 增殖 可溶性 肿瘤细胞 存活 扁桃体 

分 类 号:R735[医药卫生—肿瘤] R737[医药卫生—临床医学]

 

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