肝细胞、胰岛细胞与储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响  

作　　者：于聪慧[1] 林梅[1] 梅建民[1] 余昌中[1] 杨荣华[1] 姚军波[1] 

机构地区：[1]北京军区总医院肝胆外科,北京市100700

出　　处：《世界华人消化杂志》2004年第11期2731-2733,共3页World Chinese Journal of Digestology

基　　金：国家自然科学基金资助项目;No.30170421

摘　　要：目的:探讨肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养对肝细胞功能的影响. 方法:采用改良胶原酶消化法分离获得大鼠肝细胞和储脂细胞,同时利用梯度离心分离胰岛细胞.分两组实验,肝细胞培养组(对照组),肝细胞用RPMI1640、胰岛素10-7mol/L、100 mL/L FBS及地塞米松10-8mol/L配成细胞悬液,2 mL 放入9 cm2培养瓶中连续培养15d(37℃50mL /L CO2).肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养组(实验组):将1×10-7/L 的储脂细胞2 mL先加入培养瓶中,培养条件及培养液同肝细胞培养组,培养48 h后弃上清后将肝细胞2×108/L2 mL 和胰岛细胞(100个)分别加入并观察肝细胞存活情况;全自动生化分析仪测定培养上清液中总蛋白及尿素氮的含量;两组细胞均在培养10 d行细胞组织学及组织化学检测,包括肝细胞HE染色、肝细胞内糖原PAS染色及葡萄糖-6-磷酸酶染色检测. 结果:培养第7 d对照组部分肝细胞脱落,核固缩,胞质破碎分解.而实验组肝细胞粘壁生长好,肝细胞、储脂细胞和胰岛细胞相间形成团状和索形.培养10 d对照组肝细胞核完全固缩,胞质破碎分解,糖原、葡萄糖-6-磷酸酶的表达消失;实验组肝细胞呈片状,胞质饱满,糖原、葡萄糖-6磷酸酶的表达良好.培养5 d后实验组白蛋白及尿素氮的合成明显高于对照组(P<0.05). 结论:肝细胞、胰岛细胞和储脂细胞共培养明显延长肝细胞存活期.

关 键 词：肝细胞 胰岛细胞 储脂细胞 培养 肝细胞功能 

分 类 号：R575[医药卫生—消化系统]