东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定(英文)  

Functional Analysis of a Gene Encoding a Chlorotoxin-like Peptide Derived from Scorpion Toxin

作　　者：杨锐[1] 彭方[1] 刘辉[1] 曹志贱[1] 李文鑫[1] 毛歆[1] 蒋达和[1] 

机构地区：[1]武汉大学生命科学学院生物技术系

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》2005年第1期19-23,共5页Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology

基　　金：国家自然科学基金项目 (No .3 9970 897) ;国家科技部重点发展项目(No .2 0 0 1BA749C);武汉市重点科技项目 (No .2 0 0 2 60 0 5 13 412 )~~

摘　　要：从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 .A full length cDNA sequence encoding for the precursor of a venom peptide (named BmKCT) with homology to chlorotoxin has been isolated from a cDNA library made from the venom glands of the Chinese Scorpion Buthus martensii Karsch. The sequence of BmKCT is similar (68% identities) to that of chlorotoxin isolated from Leiurus quinquestriatus quinquestriatus. To understand the biological function of BmKCT, this peptide was expressed using pGEX expression system and purified using GST affinity column and gel filtration. Whole cell patch clamping recording showed that BmKCT could significantly inhibit chloride currents of gliomas cells, and the inhibitory effect was reversible. These results suggested that BmKCT might belong to the class of short chain toxins blocking the chloride ion channels.

关 键 词：胶质瘤细胞 氯离子通道 表达 人脑 膜片钳 GST 抑制作用 东亚钳蝎 毒腺 功能鉴定 

分 类 号：Q959[生物学—动物学] R730[医药卫生—肿瘤]