FHIT基因对人肺癌细胞A549恶性表现型抑制的体内外研究  

作　　者：张立群[1] 汪惠[1] 赖百塘[1] 岳文涛[1] 湛秀萍[1] 杨学惠[1] 张春燕[1] 张同梅[1] 

机构地区：[1]北京胸部肿瘤结核病医院

出　　处：《结核病与胸部肿瘤》2004年第4期291-298,共8页Tuberculosis and Thoracic Tumor

摘　　要：目的 研究外源FHIT基因对人肺腺癌细胞A549恶性表型的体内外抑制作用。方法 构建PEGFP-FHIT真核表达载体，Lipofectamine介导转染A549细胞，G418筛选后，有限稀释法建立单克隆细胞系FHIT-A549和PEGFP-A549。应用RT-PCR、免疫组化等方法检测外源FHIT基因的转录和表达。细胞生长曲线、集落形成试验、流氏细胞计数及裸鼠移植瘤试验研究外源FHIT基因对A549细胞体外增殖、凋亡、细胞周期和体内成瘤性等的影响。结果 经PCR、酶切和DNA测序证实PEGFP-FHIT真核表达载体连接正确。RT-PCR表明转染细胞FHIT-A549中有FHIT mRNA表达，免疫细胞化学染色FHIT-A549细胞FHIT蛋白表达强阳性，而母系A548细胞和转空载体的PEGFP-A549细胞FHIT基因和蛋白表达阴性。FHIT-A549细胞的生长曲线、集落形成率显著低于母系A549和转染空载体PEGFP-A549细胞(P<0．01)。FHIT-A549细胞凋亡率较A549和PEGFP-A549增高，FACS分析显示FHIT-A549细胞95.8％阻滞在G2期。FHIT-A549细胞移植瘤的生长速度和瘤重均显著低于母系A549和转染空载体PEGFP-A549细胞(P<0．01)。结论 外源FHIT基因表达能显著抑制人肺腺癌细胞A549的恶性增殖和分裂，诱导凋亡，调节细胞周期、抑制肿瘤原性，具有抑癌功能。

关 键 词：FHIT基因 A549细胞 体内 转染 真核表达载体 人肺癌细胞 人肺腺癌细胞 恶性 RT-PCR 抑制 

分 类 号：R734.2[医药卫生—肿瘤] R735[医药卫生—临床医学]