大肠杆菌亮氨酰－tRNA合成酶基因的克隆和鉴定  

Molecular Cloning of the Gene for Escherichia coli Leucyl-tRNA Synthetase

作　　者：邓立[1] 李冰[1] 施建平[1] 王应睐[1] 

机构地区：[1]中国科学院上海生物化学研究所

出　　处：《生物化学与生物物理学报》1994年第2期223-228,共6页

摘　　要：本文根据遗传互补原理，利用大肠杆菌亮氨酰－ｔＲＮＡ合成酶基因（ｌｅｎＳ）的温度敏感突变株ＫＬ２３１，从大肠杆菌基因文库一克隆（λ１５Ｄ７）中筛选出带完整ｌｅｕＳ基因的ＤＮＡ片段。该片段长度为３．２ｋｂ。对此片段做了１４种限制性内切酶图谱分析和部分ＤＮＡ序列鉴定，并与文献报道的ｌｅｎＳ基因序列进行了比较。发现在编码区和３’端非编码区各有一对碱基发生了转换。另外在３’端非编码区有一对碱基缺失。编码区的碱基对转换导致编码的氨基酸由组氨酸变成了精氨酸。带有ｌｅｎＳ基因的质粒（ｐＬｅｕＳ９１）转入大肠杆菌ＴＧＩ菌株中，测得转化子的亮氨酰－ｔＲＮＡ合成酶比活力是ＴＧ１菌株的１０倍以上。A 3 .2kb DNA fragment containing the gene for Escherichia coli leueyl-tRNA synthetase (lenS) has been subcloned from λ15D7 clone of E. coli genomio library by complementation of a lenS temperature sensitive mutant KL 231. The resulting clone overexpresses leucyl-URNA synthetase (LeuRS) by a factor greater than 10.When compared with the report of Michael Hrtlein and Dominique Madern, the partial DNA sequence revealed a base pair replacement both in the coding regionand in the 3' flanking region and a base pair deletion in the 3' flanking region.

关 键 词：大肠杆菌 基因克隆 亮氨酰 TRNA 

分 类 号：Q939.110.6[生物学—微生物学]