乙型肝炎病毒X蛋白调节TRAIL诱导的肝细胞凋亡  

作　　者：梁晓红[1] 孙汶生[1] 高立芬[1] 马春红[1] 韩丽辉[1] 陈有海 

机构地区：[1]山东大学医学院免疫学研究所 [2]Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania,PA19104,USA

出　　处：《中国科学（C辑）》2005年第1期59-67,共9页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:30218023;30371342)

摘　　要：观察乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF—related apoptosis—inducing ligand,TRAIL)诱导肝细胞凋亡的影响并初步探讨其分子机制.构建包含HBx 基因的真核表达载体pcDNA-HBx,转染BEL7402肝癌细胞,建立可稳定表达HBx的肝癌细胞系BEL7402-HBx,同时设立空载体pcDNA3转染对照组细胞BEL7402-cDNA3.台盼蓝染色计数, Caspase3活性检测和TUNEL法检测TRAIL诱导BEL7402,BEL7402-cDNA3,BEL7402-HBx细胞凋亡的情况,并通过流式细胞术分析3组细胞表面TRAIL受体的表达水平.此外,利用硫代反义寡核苷酸封闭HBV全基因转染肝癌细胞系HepG2.2.15中HBx蛋白的表达,观察阻断前后对TRAIL诱导凋亡敏感性的改变,进一步反向验证HBx对TRAIL诱导凋亡的调节作用.台盼蓝染色计数提示TRAIL对BEL7402,BEL7402-cDNA3,BEL7402-HBx均有剂量依赖性的细胞毒作用,但在相同浓度TRAIL作用下,BEL7402-HBx细胞较BEL7402,BEL7402-cDNA3细胞有更高的敏感性.Caspase3活性检测结果分析发现,TRAIL作用后BEL7402-HBx细胞在较短时间内有更高的Caspase3活化水平.TUNEL结果显示,10μg/LTRAIL作用下,BEL7402-HBx细胞凋亡率可达(41.4±7.2)%,显著高于对照组细胞.反义封闭HepG2.2.15细胞中HBx基因的表达可部分阻断TRAIL诱导的凋亡.两?

关 键 词：BEL7402 HB TRAIL受体 诱导 Caspase3 乙型肝炎病毒X蛋白 肝细胞凋亡 DNA 活性检测 表达水平 

分 类 号：R363[医药卫生—病理学]