猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株ORF5基因在大肠杆菌中的表达  

Expression of ORF5 Gene of Porcine reproductive and respiratory sydrome virus in E.coli

作　　者：陈建君[1] 宋长绪[1] 杨增岐[2] 王贵平[1] 

机构地区：[1]广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640 [2]西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵712100

出　　处：《动物医学进展》2005年第5期66-68,共3页Progress In Veterinary Medicine

基　　金：广东省自然科学基金(31990和04002083);国家863课题(2003AA241110)

摘　　要：根据测定的猪繁殖与呼吸综合征病毒广东株(PRRSV GD)的序列,设计一对引物。用保存的PRRSV GD 的ORF5 的克隆产物pMD ORF5 质粒作为模板,扩增ORF5基因。将该片段定向插入到原核表达载体pBAD/gⅢC中,转化大肠埃希菌。重组质粒经PCR和酶切鉴定后,用阿拉伯糖诱导表达。用Western blotting鉴定表达蛋白,证明ORF5基因得到表达。The ORF5 gene of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus was amplified by polymerase chain reaction (PCR).The DNA fragment was ligated with plasmid pBAD/gⅢC and transformed into E.coli.The constructed recombinant plasmid was confirmed by RE digestion and sequencing, and induced with arabrose. The expressed protein was detected by SDS-PAGE and Western blotting.

关 键 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 广东株 大肠杆菌 Western 原核表达载体 PRRSV 大肠埃希菌 酶切鉴定 重组质粒 诱导表达 阿拉伯糖 PCR 

分 类 号：S852.65[农业科学—基础兽医学] Q78[农业科学—兽医学]